L’obiettivo di questo libro è stato quello di determinare quanto tempo dopo la somministrazione di benzodiazepine clonazepam (CLO), il suo principale metabolita 7-aminoclonazepam (7-ACLO) potrebbe essere rilevato in campioni di urina raccolti da 10 volontari sani che hanno ricevuto una singola 3 mg dose di Klonopin (clonazepam). Tali dati sarebbero di grande importanza per le forze dell’ordine che cercano di determinare il miglior intervallo di tempo per la raccolta delle urine da una vittima di violenza sessuale facilitata dalla droga al fine di rivelare l’uso di droghe. È stato sviluppato e convalidato un metodo NCI-GC-MS altamente sensibile per la quantificazione simultanea di CLO e del suo principale metabolita 7-ACLO nelle urine. I seguenti campioni di urina sono stati raccolti da ciascun volontario: uno prima della somministrazione di CLO, e 6 h, e 1, 3, 5, 8, 10, 14, 21 e 28 giorni dopo. Tutti i campioni di urina (1 ml) sono stati estratti dopo l’aggiunta dello standard interno(D ( 5)-diazepam) e dell’idrolisi enzimatica (beta-glucuronidasi) utilizzando colonne di estrazione in fase solida. Le curve standard per CLO (500-4000 pg x mL (-1)) e 7-ACLO (50-2000 pg x mL(-1)) sono state preparate aggiungendo aliquote di urina negativa. L’urina di ogni soggetto era ancora positiva per 7-ACLO 14 giorni dopo la somministrazione del farmaco. Otto dei dieci volontari avevano quantità misurabili del metabolita 21 giorni dopo la somministrazione. Un volontario era ancora positivo 28 giorni dopo la somministrazione. Sei dei volontari avevano concentrazioni di urina di 7-ACLO che hanno raggiunto il picco a 1 giorno dopo la somministrazione. Un volontario aveva la più alta concentrazione di 7-ACLO a 3 giorni, due volontari a 5 giorni e uno a 8 giorni. L’intervallo di concentrazioni rilevato era compreso tra 73,0 pg x mL(-1) e 183,2 ng x mL(-1). CLO non è stato rilevato in nessuno dei campioni.