토론
이 연구는 증거를 제공 β-세포에서 잘 작동할 수 있는 이식 없이 사이트 근처의 비 β-cells. 연구하기 위해 제 3 세포 농축 이식편,독도는 형광 활성화 세포 정렬을 허용하기 위해 단일 세포로 분산되어야했습니다. 따라서 우리의 초기 연구는 섬 분산 및 이식 결과에 대한 재 응집의 효과를 조사했습니다. 분산 된 세포가 이식 전에 재 응집되었을 때,고혈당을 역전시키기 위해 더 적은 수의 세포가 필요했습니다. 재집합된 섬들은 체중과 일치하는 비당뇨병성,이식되지 않은 대조군 마우스와 유사한 포도당 프로파일을 가졌다. 그러나 250 만 개의 분산 된 섬 세포를 이식 한 마우스는 포도당 내성 검사 후 혈당 수치가 더 낮았습니다. 이 발견은 분산 된 섬 세포의 이식이 효율적일 수 있음을 나타내며 충분한 수를 이식 할 수 있음을 나타냅니다. 그러나 섬 세포가 이식 전에 재 응집되면 세포 수의 절반이 정상 혈증을 회복 할 수 있습니다. 이 결과는 인슐린 분비 반응이 분산 된 섬 세포에서 감소하고 세포의 재 응집에 의해 개선된다는 것을 보여준 이전의 여러 연구와 일치합니다(24-27). 이 우량한 결과는 인슐린 분비에 세포 커뮤니케이션의 긍정적인 영향 때문일지도 모르곱니다 집계한 세포가 세포 사멸에 저항한다는 것을 질문을 대략 제기합니다. 이 분산 된 세포는 이식 후 생체 내에서 클러스터를 형성 가능성이 있지만,많은 세포가 이식 후 첫 번째 일에 손실 된 후이 발생할 수 있습니다. 요약하자면,이산된 세포의 더 큰 수가 처음에 과혈당을 반전할 것을 요구되다 분명합니다.
우리의 다음 연구에서 분산 된 섬 세포 형광 활성화 셀 정렬을 사용 하 여 셀에 대 한 농축 했다. 이전에 설명 된 바와 같이(19-21)세포는 내인성 형광 및 전방 산포(크기)에 따라 분류되었습니다. 이 기술을 사용하여 우리는 95%의 세포 집단을 얻을 수있었습니다. 이러한 세포 농축 분획은 이식 전에 재결합되었다. 생쥐는 전체 섬의 비슷한 볼륨으로 이식 하는 마우스와 비슷한 방식으로 고혈당의 급속 한 반전 했다. 이는 세포 이식-세포 이식-세포 이식에 비해 섬 이식-세포의 수가 낮았다는 것을 주목해야한다. 95%의 세포 순도를 가진 세포 이식은 섬보다 20%더 많은 세포를 포함했을 가능성이 높습니다. 그러나,연구의 목적은 섬 이식에 사용되는 것과 유사한 양으로 이식 된 정제 된 세포-세포가 당뇨병을 역전시킬 수 있고 줄기 세포에서 유래 된 세포-세포가 당뇨병 환자에게 이식하는 데 유용 할 수 있는지 여부를 확립하는 것이 었습니다. 이식 4 주 후 포도당 내성 검사에서,세포-농축 응집체로 이식 된 마우스는 혈당 수치가 약간 낮았으며 섬으로 이식 된 것보다 인슐린 수치가 약간 높은 경향이 있었다. 그러나 12 주까지는 포도당 내성,인슐린 수치 또는 이식 인슐린 함량과 관련하여 이들 그룹간에 차이가 없었습니다. 이 실험 시리즈에서,비당뇨병성,이식되지 않은 대조군 마우스는 체중이 일치하기보다는 연령이 일치하였다. 이식된 쥐의 무게가 당뇨병의 그들의 기간 도중 안정되어 있 남아 있었거나 떨어졌더라도 반면,대조군 쥐는 학문을 통하여 무게를 얻는 것을 계속했습니다. 그들의 빈약한 포도당 포용력 및 더 높은 인슐린 수준은 이 통제 쥐가 인슐린 저항성이 되었었다는 것을 건의합니다. 또한,이식된 마우스의 낮은 글루코오스 수준은 래트가 전형적으로 마우스보다 낮은 글루코오스 수준을 가지며,글루코오스-자극된 인슐린 분비에 대한 더 낮은 세트 포인트를 가질 수 있기 때문에,래트 섬이 이식되었다는 사실에 의해 설명될 수 있다.
이 결과는 제 2 의 세포 농축 응집체의 이식 결과가 섬들의 이식 결과와 유사하다는 것을 보여준다. 제 2-세포들의 정제된 개체군의 이식은 이전에 키뮬렌 등에 의해 보여졌다. (28)이 연구에서 이식 전에 내분비 비–세포-세포와 내분비 비-세포-세포를 혼합하는 것이 이식 기능을 향상 시켰다고 제안되었지만 성공하려면. 키믈렌 연구에서,이식편은 본 연구에서 12 주보다는 64 주 동안 연구되었다. 그들의 쥐의 세포 이식편 및 혼합 이식편 쥐의 세포 및 혼합 이식편 쥐의 세포 및 혼합 이식편 쥐의 세포 및 혼합 이식편 쥐의 세포 및 혼합 이식편 쥐의 세포 및 혼합 이식편 쥐의 세포 및 혼합 이식편 쥐의 세포 및 혼합 이식편 쥐의 세포 및 혼합 이식편 쥐의 세포 및 혼합 이식편 쥐의 세포 및 혼합 이식편 쥐의 세포 및 혼합 이식편 쥐의 세포 및 혼합 64 주까지,모든 이식편은 정제 된 세포-세포 또는 다른 내분비 비-세포–세포와 혼합 된 세포를 포함했는지 여부에 관계없이 부분적으로 또는 완전히 실패했습니다. 그러나,그들은 최소 질량 모델로 간주 될 수있는 쥐에 약 1.2-1.7 백만 개의 세포를 이식했다. 이 철저한 연구는 또한 나이가 많은 쥐 기증자의 세포가 젊은 쥐 기증자의 세포뿐만 아니라 기능하지 않는다는 것을 보여주었습니다. 따라서,키 묄렌 연구는 두 가지 모두 정제 된 세포-세포로 구성된 이식편의 인상적인 기능을 보여준다는 점에서 현재 연구의 결과를 보완합니다. 잠재적으로 이식의 결과에 기여할 수 있는 섬 내의 다른 세포 유형은 이식된 섬(15,16)의 혈관 재생에 공헌하기 위하여 보고된 내피 성장 세포입니다. 그러나 의미있는 기여를 할 수있는 충분한 세포가 있다는 것은 분명하지 않습니다. 그럼에도 불구 하 고,그것은 분명 현재 연구에서 내 분 비–제 2 세포 및 기증자 내 피 이식된 섬 이식의 기능에 도움이 될 수 있습니다,하지만 그들은 성공적인 이식에 대 한 필수적인 것 같지 않습니다. 이 발견은 줄기 세포 또는 다른 출처에서 체외에서 유래 된 세포가 이식 목적에 매우 유용 할 수 있음을 나타냅니다.
이식 12 주 후 이식편 조성물을 연구했을 때,세포–농축 응집체는 초기 제제에서와 같이 이식편에서 비-세포-세포의 거의 동일한 5%를 가졌다. 이것은 놀라운 일이 아니었지만,처음에 25%가 아닌 섬–세포가 이식편 내에서 5%만 가지고 있다는 것을 발견하는 것은 놀라운 일이었습니다. 이 세포의 대부분은 글루카곤을 함유 한 세포입니다. 만약 세포 농축 이식편이 섬 이식편과 같은 정도로 비–세포-세포를 잃었다면,이식 후 비-세포-세포의 1%만 가질 것으로 예상했을 것이다. 또한 섬 이식편에서 비-세포-세포의 손실이 5%에서 멈추는 것처럼 보였으며,이는 비–세포-세포-농축 이식편에서 발견 된 비–세포-세포의 동일한 비율이었다. 이러한 연구 결과와 일치하여,우리는 또한 미성숙 신생아 돼지 췌장 세포 클러스터가 누드 마우스에 이식되었을 때,몇 달 후 이식편은 95%95%95%세포(29). 쥐 섬을 가진 현재 실험의 이 현상은 전에 기술된 것과 같이 비–세포-세포의 우선적인 죽음에 의해 설명될 수 있습니다(30-33). 이 연구와 우리 자신의 결론은 글루카곤 생산 세포(30-33)가 주로 감소한다고 결론 지었다. 우리는 셀과 폴리 프로필렌 세포도 사라 졌는지 여부를 알 수 없습니다. 설치류 독도에서 세포-제 2 의 주변 지역화는 잠재적으로 격리하는 동안 손상에 더 취약 할 수 있습니다. 비록 우리가 본 연구에서 자세히 연구 하지 않은,이전 연구는 이것이 이식 후 세포 손실-세포 손실에 대 한 주요 이유는 지적 했다. 라우 등의 연구에서. (33),간에서 이식 된 섬은 이식 후 4 주에 세포를 잃어 버렸지 만,동일한 격리로부터 신장에 이식 된 섬은 분리 관련 사건이 이러한 말초 세포의 손실을 유발하지 않았 음을 나타내지 않았다(33). 이 연구에서,독도에 이식 intraportally 의 손실을 보였 α-세포는 반면,독도 이식에서 신장 캡슐을 보였의 손실 없 α-세포입니다. 현재의 연구에서,우리는 이식 후 1 주 신장 캡슐 아래 섬에있는 비–세포-세포의 손실을 보았다. 그들의 연구와 본 연구의 한 가지 차이점은 그들이 정상 혈당 쥐에 섬을 이식 한 반면,현재 연구에서받는 사람은 고혈당 쥐였습니다. 세포 생존-그것은 섬 이식에 대사 부하의 차이가 제 2 형에 영향을 미칠 수 있다는 가능성이있다. 그것은 것을 배제 할 수 없다. (33)보고. 군터 외. (31)는 당뇨병 쥐(31)의 간으로 이식 한 후 2 일 이내에 세포(31)의 손실을보고했다. 글루카곤 및 다른 비–세포 유래 펩티드의 정상 수준이 여전히 내인성 췌장에 의해 생성되기 때문에,이식편의 비–세포 세포가 고혈당증을 예방하기위한 퇴화로 인해 사라질 가능성이 있습니다.
언젠가는 실질적인 중요성이 될 수 있는 가설적인 질문은 순수한 세포 이식편이 적절한 이식 결과를 제공할지 여부이다. 이식편으로부터의 글루카곤 분비의 전신 대사 효과의 관점에서,이식편으로부터의 분비가 급성 저혈당(34)에 대한 최소한의 보호를 제공한다는 것이 나타나지만,인간 섬 이식은 정상적인 포도당 수준 근처에서 유지할 수있다. 췌장에서 지속적인 글루카곤 분비는 포도당 항상성에 약간 기여금을 할지도 모르지만,다시,심각한 저혈당증에 대하여 조금 보호. 이 불충분한 글루카곤 응답은 수령인을 운동(35,36)도중 저혈당증에 더 수그린 시킬 수 있었습니다,그러나 이것은 이득을 중요한 것은 확률이 낮습니다. 다음 질문은 섬이 아닌 셀의 중요한 지역적 영향이 있는지 여부입니다. 섬 미세 혈관 해부학 및 생리 학적 실험을 고려할 때 비–세포-세포가 비-세포(13,14)의 하류에 있음을 보여주는,대부분의-세포는 비–세포(13,14)의 영향을받지 않는 것으로 보인다. 몇 가지 통찰력은 우리의 측정에 의해 제공 될 수 있으며,이는 세포가 비-세포로부터 얼마나 멀리 떨어져 있는지를 결정합니다. 우리가 비-셀에 근접한 100–셀의 수를 정량화했을 때,100-셀의 65-75%가 비-셀에서 50–100-셀의 65-75%가 비-셀에서 50-100-셀의 65-75%인 것으로 나타났습니다. 비-제 2-세포로부터의 국소 분비가 그 거리에서 많은 파라 크린 영향을 미칠 수있는 것 같지는 않다. 또한 다른 연구(37,38)에서 우리는 이식 된 섬의 미세 혈관이 정상과 매우 다르다는 것을 알고 있습니다. 따라서,섬 이식의 해부학 췌 장에 있는 섬에서 매우 다른 아직 이러한 이식 당뇨병 받는 사람에 고혈당 역전에 여전히 효과가 있다.
결론적으로,우리는 세포 농축 응집체가 생쥐에서 고혈당을 효과적으로 역전시킬 수 있고 이식 된 손상되지 않은 섬이 비-세포-세포에서 고갈된다는 것을 발견했다. 따라서 섬이 아닌 셀은 성공적인 섬 이식에 필수적인 것은 아닙니다.