Das Ziel dieses Papiers war es zu bestimmen, wie lange nach der Verabreichung von Benzodiazepin Clonazepam (CLO) sein Hauptmetabolit 7-Aminoclonazepam (7-ACLO) im Urin von 10 gesunden Freiwilligen nachgewiesen werden konnte, die eine einzelne 3-mg-Dosis von Clonazepam Clonopin (Clonazepam). Solche Daten wären für Strafverfolgungsbehörden von großer Bedeutung, die versuchen, das beste Zeitintervall für die Urinsammlung eines Opfers drogenbedingter sexueller Übergriffe zu bestimmen, um den Drogenkonsum aufzudecken. Eine hochempfindliche NCI-GC-MS-Methode zur gleichzeitigen Quantifizierung von CLO und seinem Hauptmetaboliten 7-ACLO im Urin wurde entwickelt und validiert. Die folgenden Urinproben wurden von jedem Freiwilligen gesammelt: eine vor der CLO-Verabreichung und 6 h und 1, 3, 5, 8, 10, 14, 21 und 28 Tage danach. Alle Urinproben (1 ml) wurden nach Zugabe des internen Standards (D(5)-diazepam) und enzymatischer Hydrolyse (Beta-glucuronidase) mit Festphasenextraktionssäulen extrahiert. Standardkurven für CLO (500-4000 pg x mL (-1)) und 7-ACLO (50-2000 pg x ml (-1)) wurden durch Spicken von Aliquots von negativem Urin hergestellt. Der Urin jedes Probanden war 14 Tage nach Verabreichung des Arzneimittels immer noch positiv für 7-ACLO. Acht der zehn Freiwilligen hatten messbare Mengen des Metaboliten 21 Tage nach der Verabreichung. Ein Freiwilliger war 28 Tage nach der Verabreichung immer noch positiv. Sechs der Freiwilligen hatten Urinkonzentrationen von 7-ACLO, die 1 Tag nach der Verabreichung ihren Höhepunkt erreichten. Ein Freiwilliger hatte die höchste Konzentration von 7-ACLO nach 3 Tagen, zwei Freiwillige nach 5 Tagen und einer nach 8 Tagen. Der Bereich der nachgewiesenen Konzentrationen lag zwischen 73,0 pg x ml (-1) und 183,2 ng x ml(-1). CLO wurde in keiner der Proben nachgewiesen.