Généralement, la transmission se produit pendant la nuit, lorsque les insectes sont les plus actifs, moment auquel ils prennent leur repas de sang sur des humains endormis. Le parasite est transmis lors de ce contact, mais la forme d’infection libre (flagellée) se trouve dans les fèces de l’insecte plutôt que dans les glandes salivaires comme chez la plupart des autres vecteurs arthropodes. La maladie de Chagas est généralement transmise par des vecteurs triatomines suceurs de sang vivant dans des habitations résidentielles (vecteurs domestiques) en contact étroit avec les humains. En effet, les principales interventions pour diminuer la transmission se concentrent sur l’élimination des vecteurs qui vivent dans les habitations. Les parasites sont concentrés dans le bulbe rectal dans la partie terminale du tube digestif de l’insecte, et pendant le repas de sang ou peu de temps après, les insectes défèquent et déposent les excréments infectés sur la peau ou près de la muqueuse. La morsure provoque une abrasion cutanée qui permet au parasite de pénétrer sous la peau. Cette transmission est complexe, et toutes les étapes ne sont pas bien comprises. Sa charge dépend de nombreux facteurs, y compris ceux qui favorisent le contact du vecteur humain et ceux qui permettent au parasite d’entrer dans son hôte.