introduktion: Thrombin generation (TG) vurderer en persons hæmostatiske kapacitet og er tegn på en persons risiko for blødning og trombose. TG afhænger af balancen mellem pro-og antikoagulationsprocesserne i koagulationsplasma. For nylig udviklede vi en metode til at studere de vigtigste Pro – og antikoagulerende processer på basis af TG, kaldet thrombindynamikmetoden. K-vitaminantagonist (VKA) behandling er kendt for at reducere TG, og at reduktionen af TG korrelerer med det internationale normaliserede forhold (INR). I denne undersøgelse sigter vi mod at undersøge effekten af VKA-terapi på dynamikken i TG ved at undersøge protrombinkonvertering og trombininaktivering.
materialer og metoder: TG blev målt i blodpladefattigt plasma ved 1 pm vævsfaktor hos 129 raske forsøgspersoner og 129 patienter behandlet med VKA. Patienterne blev klassificeret efter INR-værdien: INR<2 (n=17), 2<INR<3 (n=55), 3<INR<4 (n=38) og INR> 4 (n=19). Thrombindynamikken blev beregnet ud fra TG-kurver og plasma-antithrombin (AT), larr2-makroglobulin (a2M) og fibrinogenniveauer. Tre trombindynamikparametre blev bestemt: den totale mængde protrombinkonvertering (PCtot), den maksimale hastighed for protrombinkonvertering (Pcmaks) og thrombin-henfaldskapaciteten (TDC) for hver plasmaprøve.
resultater: K-vitaminantagonistbehandling reducerede ETP og peak højde signifikant ved alle INR-værdier (p<0,001), og INR er negativt korreleret med TEP og peak højde (R2=0,47, p < 0,001). Forsinkelsestiden blev øget hos patienter sammenlignet med kontroller (3, 3 vs. 16, 3 min, P<0, 001). VKA reducerer protrombinkonvertering ved at reducere både den samlede mængde konverteret protrombin og protrombinasens maksimale hastighed (figur 1a-C). Overraskende blev hastigheden af trombininaktivering svækket hos patienter behandlet med VKA, og denne effekt var uafhængig af INR (0,67 vs. 0,58 min-1, p<0,001, figur 1D).
som tidligere rapporteret er thrombinaffaldskapaciteten hovedsageligt afhængig af plasmaantithrombin-og fibrinogenniveauet. Plasma-antithrombinniveauer var sammenlignelige mellem raske forsøgspersoner og patienter på VKA (figur 2a) og viste en klar positiv korrelation med thrombin-henfaldskonstanten i patientgruppen (R2=0,72, p<0,001, figur 2C). Da antithrombinniveauerne ikke var forskellige mellem raske forsøgspersoner og patienter, kunne forskellen i TDC ikke tilskrives antithrombin. I modsætning hertil blev fibrinogenniveauer forhøjet hos alle patienter uanset INR (figur 2b) og var negativt korreleret med TDC (R2=0,13, p<0,001, figur 2D). Derfor udførte vi i silicotest for at undersøge, om trombinfald er svækket hos patienter ved forhøjede niveauer af fibrinogen ved at beregne protrombinkonvertering, som om fibrinogenniveauer var fysiologiske (det gennemsnitlige fibrinogenniveau fundet i gruppen af raske forsøgspersoner). Figur 2e-f viser, at thrombin-henfaldskapaciteten hos patienter faktisk reduceres sammenlignet med kontroller på grund af øgede fibrinogenniveauer. Hvis de målte fibrinogenniveauer i en in silico-model af thrombin-henfaldskapaciteten erstattes af de gennemsnitlige sunde subjektfibrinogenniveauer, gendannes trombin-henfaldskonstanten til normal (0,67 vs. 0,63 min-1, p=0,238) hos de VKA-behandlede patienter.
konklusion: Thrombindynamikanalyse viser, at protrombinkonvertering reduceres hos patienter behandlet med VKA, og at trombininaktivering er signifikant svækket. Vi demonstrerer, at sidstnævnte effekt kan tilskrives de forhøjede fibrinogenniveauer, der ledsager VKA-behandling.
Thrombindynamik hos raske forsøgspersoner og VKA-patienter. (A) protrombinkonverteringskurver. (B) PCtot: total mængde protrombin konverteret; (C) Pcmaks: maksimal hastighed for protrombinkonvertering; (D) TDC: thrombinfaldskapacitet. * p<0, 05, **p<0, 01, * * * p< 0, 001 sammenlignet med raske forsøgspersoner.
Thrombindynamik hos raske forsøgspersoner og VKA-patienter. (A) protrombinkonverteringskurver. B) pctot: samlet konverteret protrombinmængde C) Pcmaks: maksimal protrombinomregningshastighed; D) TDC: trombin henfaldskapacitet. * p<0, 05, **p<0, 01, * * * p< 0, 001 sammenlignet med raske forsøgspersoner.
rollen af plasmaantithrombin-og fibrinogenniveauerne i dæmpningen af trombininaktiveringskapaciteten hos patienter på VKA. A) Antithrombinniveauer hos raske forsøgspersoner og patienter B) fibrinogenniveauer hos raske forsøgspersoner og patienter. (C-d) korrelationen mellem thrombin-henfaldskapaciteten og antithrombin (C) og fibrinogenniveauer (d). E) den målte thrombinaffaldskapacitet hos raske forsøgspersoner og patienter. (F) den simulerede trombinforfaldskapacitet hos heathy-forsøgspersoner og patienter ved fysiologiske fibrinogenniveauer. * p<0, 05, **p<0, 01, * * * p< 0, 001 sammenlignet med raske forsøgspersoner.
rollen af plasmaantithrombin-og fibrinogenniveauerne i dæmpningen af trombininaktiveringskapaciteten hos patienter på VKA. A) Antithrombinniveauer hos raske forsøgspersoner og patienter B) fibrinogenniveauer hos raske forsøgspersoner og patienter. (C-d) korrelationen mellem thrombin-henfaldskapaciteten og antithrombin (C) og fibrinogenniveauer (d). E) den målte thrombinaffaldskapacitet hos raske forsøgspersoner og patienter. (F) den simulerede trombinforfaldskapacitet hos heathy-forsøgspersoner og patienter ved fysiologiske fibrinogenniveauer. * p<0, 05, **p<0, 01, * * * p< 0, 001 sammenlignet med raske forsøgspersoner.
Hemker:Diagnostica Stago: Rådgivning.