Bevezetés: a Thrombin generation (TG) felméri az egyén vérzéscsillapító képességét, és jelzi a személy vérzésének és trombózisának kockázatát. A TG az alvadási plazmában zajló pro – és antikoaguláns folyamatok egyensúlyától függ. A közelmúltban kifejlesztettünk egy módszert a TG alapján a fő pro – és antikoaguláns folyamatok tanulmányozására, amelyet trombindinamikai módszernek nevezünk. A K-Vitamin antagonista (VKA) kezelésről ismert, hogy csökkenti a TG-t, és hogy a TG csökkenése korrelál a nemzetközi normalizált arány (INR). Ebben a tanulmányban arra törekszünk, hogy megvizsgáljuk a VKA terápia hatását a TG dinamikájára a protrombin konverzió és a trombin inaktiváció vizsgálatával.
anyagok és módszerek: a TG-t thrombocyta szegény plazmában mérték 1 pM szöveti Faktornál 129 egészséges alanynál és 129 VKA-val kezelt betegnél. A betegeket az INR-érték szerint osztályozták: INR<2 (n=17), 2<INR<3 (n=55), 3<INR<4 (n=38) és INR>4 (n=19). A trombin dinamikáját a TG-görbék, valamint a plazma antitrombin (AT), az A2-makroglobulin (A2M) és a fibrinogén szintek alapján számították ki. Három trombindinamikai paramétert határoztak meg: a protrombin konverzió teljes mennyiségét (PCtot), a protrombin konverzió maximális sebességét (PCmax) és az egyes plazmaminták trombin bomlási kapacitását (TDC).
eredmények: a K-Vitamin antagonista kezelés jelentősen csökkentette az ETP-t és a csúcsmagasságot minden INR-értéknél (p<0,001), és az INR negatív korrelációt mutatott a TEP-vel és a csúcsmagassággal (R2=0,47, p< 0,001). A késleltetési idő megnövekedett a betegeknél a kontrollokhoz képest (3, 3 vs.16, 3 perc, P<0, 001). A VKA csökkenti a protrombin konverziót azáltal, hogy csökkenti mind a protrombin átalakított teljes mennyiségét, mind a protrombináz maximális sebességét (1A-C ábra). Meglepő módon a trombin inaktiváció sebessége a VKA-val kezelt betegeknél attenuált volt, és ez a hatás független volt az INR-től (0, 67 vs.0, 58 min-1, p<0, 001, 1D ábra).
amint arról korábban beszámoltunk, a trombin bomlási képessége főként a plazma antitrombin és fibrinogén szintjétől függ. A plazma antitrombinszintek hasonlóak voltak az egészséges alanyok és a VKA-val kezelt betegek között (2A.ábra), és egyértelmű pozitív korrelációt mutattak a trombin bomlási állandójával a betegcsoportban (R2=0, 72, p<0, 001, 2C. ábra). Mivel az antitrombinszintek nem különböztek az egészséges alanyok és a betegek között, a TDC-ben mutatkozó különbség nem tulajdonítható az antitrombinnak. Ezzel szemben a fibrinogénszintek minden betegnél emelkedtek, függetlenül az INR-től (2B ábra), és negatív korrelációt mutattak a TDC-vel (R2=0, 13, p<0, 001, 2D ábra). Ezért silico-tesztben végeztük annak vizsgálatát, hogy a trombin bomlása a betegeknél a fibrinogén emelkedett szintjével gyengül-e, a protrombin konverzió kiszámításával, mintha a fibrinogén szintje fiziológiás lenne (az egészséges alanyok csoportjában található átlagos fibrinogénszint). A 2e-F ábra azt mutatja, hogy a trombin bomlási kapacitása a betegeknél a megnövekedett fibrinogénszint miatt csökken a kontrollokhoz képest. Ha a trombin bomlási kapacitásának in silico modelljében a mért fibrinogénszinteket az egészséges alany átlagos fibrinogénszintje helyettesíti, akkor a trombin bomlási állandója normalizálódik (0,67 vs.0,63 min-1, p=0,238) a VKA-val kezelt betegeknél.
következtetés: a Trombindinamikai elemzés azt mutatja, hogy a protrombin konverzió csökkent a VKA-val kezelt betegeknél, és a trombin inaktivációja jelentősen csökkent. Bemutatjuk, hogy ez utóbbi hatás a VKA-kezelést kísérő emelkedett fibrinogénszintnek tulajdonítható.
trombin dinamika egészséges egyénekben és VKA betegekben. A) protrombin konverziós görbék. B) PCtot: az átalakított protrombin teljes mennyisége; C) PCmax: a protrombin konverzió maximális sebessége; D) TDC: trombin bomlási kapacitás. *p<0, 05, **p<0, 01, ** * p<0, 001 egészséges egyénekhez képest.
trombin dinamika egészséges egyénekben és VKA betegekben. A) protrombin konverziós görbék. B) PCtot: az átalakított protrombin teljes mennyisége; C) PCmax: a protrombin konverzió maximális sebessége; D) TDC: trombin bomlási kapacitás. *p<0, 05, **p<0, 01, ** * p<0, 001 egészséges egyénekhez képest.
a plazma antitrombin – és fibrinogénszintjének szerepe a trombin inaktivációs képességének csökkentésében VKA-val kezelt betegeknél. A) Antitrombinszintek egészséges alanyokban és betegekben; B) Fibrinogénszintek egészséges alanyokban és betegekben. (C-D) a trombin bomlási képességének korrelációja az antitrombin (C) és a fibrinogén szinttel (d). E) a trombin mért bomlási képessége egészséges egyénekben és betegekben. (F) a szimulált trombin bomlási kapacitás heathy alanyok és betegek fiziológiás fibrinogén szinten. *p<0, 05, **p<0, 01, ** * p<0, 001 egészséges egyénekhez képest.
a plazma antitrombin – és fibrinogénszintjének szerepe a trombin inaktivációs képességének csökkentésében VKA-val kezelt betegeknél. A) Antitrombinszintek egészséges alanyokban és betegekben; B) Fibrinogénszintek egészséges alanyokban és betegekben. (C-D) a trombin bomlási képességének korrelációja az antitrombin (C) és a fibrinogén szinttel (d). E) a trombin mért bomlási képessége egészséges egyénekben és betegekben. (F) a szimulált trombin bomlási kapacitás heathy alanyok és betegek fiziológiás fibrinogén szinten. *p<0, 05, **p<0, 01, ** * p<0, 001 egészséges egyénekhez képest.
Hemker:Diagnostica Stago: Tanácsadás.