図3:DROSHA抗体(ab12286)を用いたICC
ヒト雌羊膜細胞をDrosha(FITC)で免疫染色した(1/25希釈)。 DNAはヨウ化プロピジウムで赤色に標識されている。
RISCおよびRITS
核分裂酵母(Schizosaccharomces pombe)における研究は、動原体サイレンシング(動原体反復領域に統合される導入遺伝子をサイレンシングするプロセス)がRNAi経路の成分を必要とするため、この場合サイレンシングは転写レベルで動作することを実証している(Ekwall2004;Verdel and Moazed2005)。
分裂酵母のエフェクター複合体はRISCとは異なるように見える。 代わりに、siRNAは、RITS(RNA−induced Initiation o f Transcriptional Gene Silencing)と呼ばれる複合体に組み込まれる。 RITSは、クロモドメインタンパク質(Chp1)、Argonaute1(Ago1)、未知の機能のタンパク質、Tas3、ならびにsiRNA分子を含む。
RITSは、ヒストンメチル化を介してヘテロクロマチンとして知られている抑圧的なクロマチン構造の産生を介してサイレンシングのための特定の染色体
概要
長いdsRNAの導入によって媒介されるRNAiは、植物やショウジョウバエを含む様々な生物における遺伝子機能を調査するために使用されてきたが、30ヌクレオチドより長いdsRNAの導入は、非特異的インターフェロン応答(抗ウイルス応答)を誘導し、mRNAの分解をもたらし、またmRNA翻訳の全体的な阻害を引き起こすため、このアプローチは哺乳類細胞には適用できない。
これらの問題を回避するために、ダイサー産物を模倣する化学合成siRNA分子を使用して、哺乳動物の遺伝子機能を調べることができます。
あるいは、短いヘアピンRNA分子を産生するように設計されたプラスミドベクターを利用して、哺乳動物系で遺伝子サイレンシングを誘導することが したがって、将来的には、特定のmRNAの分解を指示することによって遺伝子発現を遮断することによってヒト疾患を治療することが可能であり得る。
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