Figure 3: ICC avec anticorps Drosha (ab12286)
Amniocytes femelles humains immunisés avec Drosha (FITC) (dilution au 1/25). L’ADN est marqué en rouge avec de l’iodure de propidium.
RISC et RITS
Des études sur la levure de fission (Schizosaccharomces pombe) ont démontré que le silençage centromérique (le processus de silençage des transgènes qui s’intègrent dans les régions de répétition centromériques) nécessite des composants de la voie de l’ARNi et, par conséquent, dans ce cas, le silençage fonctionne au niveau transcriptionnel (Ekwall 2004; Verdel et Moazed 2005).
Le complexe effecteur de la levure de fission semble être distinct du RISC. Les ARNSI sont plutôt incorporés dans un complexe appelé RITS (ARN-induced Initiation of Transcriptional Gene Silencing). RITS comprend une protéine chromodomaine (Chp1), l’Argonaute 1 (Ago1), une protéine de fonction inconnue, Tas3, ainsi que des molécules d’ARNsi.
Le RITS cible des zones chromosomiques spécifiques pour les réduire au silence par la production d’une structure de chromatine répressive connue sous le nom d’hétérochromatine par méthylation des histones.
Résumé
L’ARNi médié par l’introduction d’un ARND long a été utilisé pour étudier la fonction génique dans une variété d’organismes, y compris les plantes et la Drosophile, mais cette approche ne peut pas être appliquée aux cellules de mammifères car l’introduction d’un ARND de plus de 30 nucléotides induit une réponse interféron non spécifique (réponse antivirale), qui entraîne la dégradation de l’ARNm et provoque également une inhibition globale de la traduction de l’ARNm.
Pour contourner ces problèmes, des molécules d’ARNsi synthétisées chimiquement qui imitent les produits Dicer peuvent être utilisées pour étudier la fonction génique chez les mammifères.
Alternativement, des vecteurs plasmidiques conçus pour produire des molécules d’ARN en épingle à cheveux courtes peuvent être exploités pour induire le silençage génique dans les systèmes mammaliens. Ainsi, à l’avenir, il pourrait être possible de traiter les maladies humaines en arrêtant l’expression des gènes en dirigeant la dégradation de l’ARNm spécifique.
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