Figura 3: ICC com anticorpo Drosha (ab12286)
amniócitos humanos femininos imunossupressores com Drosha (FITC) (diluição de 1/25). O ADN é rotulado vermelho com iodeto de propídio.
RISC e RITS
Estudos na fissão de levedura (Schizosaccharomces pombe) demonstraram que centromeric silenciamento (o processo de silenciamento de transgenes que se integram em centromeric repita regiões) necessita de componentes da via de RNAi e, portanto, neste caso, silenciando opera no nível transcricional (Ekwall 2004; Verdel e Moazed 2005).
o complexo efector da levedura de fissão parece ser distinto do RISC. siRNAs são incorporadas em um complexo denominado RITS (Iniciação induzida pelo RNA do silenciamento do Gene Transcriptional). RITS comprises a chromodomain protein (Chp1), Argonaute 1 (Ago1), a protein of unknown function, Tas3, as well as siRNA molecules.
RITS Visa áreas cromossômicas específicas para silenciar através da produção de uma estrutura de cromatina repressiva conhecida como heterocromatina através da metilação histona.
Resumo
RNAi mediada pela introdução de longo dsRNA tem sido utilizada para investigar a função dos genes em uma variedade de organismos, incluindo plantas e Drosophila, no entanto, essa abordagem não pode ser aplicado às células de mamíferos, como a introdução de dsRNA mais de 30 nucleotídeos induz a um não-específica interferon resposta (anti-viral, resposta), o que resulta na degradação de mRNA e também provoca uma inibição global da tradução do mRNA.Para contornar estes problemas, moléculas de siRNA sintetizadas quimicamente que imitam produtos Dicer podem ser usadas para investigar a função genética em mamíferos.Em alternativa, os vectores plasmídicos concebidos para produzir moléculas de ARN do gancho de cabelo curto podem ser explorados para induzir o silenciamento genético em sistemas de mamíferos. Assim, no futuro, poderá ser viável tratar doenças humanas desligando a expressão genética, orientando a degradação de um ARNm específico.
ver todos os recursos de interferência de ARN.