Abstract
receptory alfa-1-adrenergiczne niefusującej linii komórek mięśniowych (BC3H1) zostały zidentyfikowane na preparatach nienaruszonych i uszkodzonych przez komórki przy użyciu antagonisty prazosyny o wysokim powinowactwie. W nienaruszonych komórkach, zarówno badania równowagi, jak i kinetyki dały wartości KD w zakresie 0,07-0,12 nM. Maksymalna liczba miejsc wiązania określona przez Analizę rozproszoną wynosiła ok. 85,000 +/- 9,000 strony / komórka. Antagoniści wiązali się z miejscami wiązania prazosyny z cechami Michaelisa-Mentena, a ich swoistość była typowa dla receptorów alfa-1-adrenergicznych. Nie zaobserwowano istotnej modyfikacji wiązania antagonistycznego ani po zaburzeniu komórek, ani przez obniżenie temperatury inkubacji do 4 stopni. Natomiast w nienaruszonych komórkach w temperaturze 37 stopni krzywe konkurencji agonistycznej były płytkie, ze współczynnikami Hill poniżej 1. Heterogeniczność miejsc wiązania prazosyny w kierunku ( — ) – noradrenaliny pojawiła się również w doświadczeniach nasycenia prazosyną przeprowadzonych pod nieobecność i w obecności tego agonisty. Po rozerwaniu komórek wartości EC50 krzywych konkurencji agonistycznej zmniejszyły się, a współczynniki Hill były bliskie 1. Kiedy temperatura została obniżona z 37 stopni do 4 stopni, powinowactwo do (–)- noradrenaliny w nienaruszonych komórkach wzrosło dramatycznie o 10 000 razy, a współczynnik Hill krzywej konkurencji był równy jedności. To przesunięcie powinowactwa wywołane temperaturą nie było tak ważne w preparatach z łamanymi komórkami (50 razy).