Abstract
alfa 1-adrenerge receptoren van een niet-fuserende spiercellijn (BC3H1) zijn geïdentificeerd op intacte en gebroken celpreparaten door gebruik te maken van de antagonist met hoge affiniteit prazosine. In intacte cellen gaven zowel evenwichts-als kinetische studies KD-waarden in het bereik van 0,07-0,12 nM. Het maximale aantal bindingsplaatsen bepaald door Scatchard analyse was ongeveer 85,000 +/- 9,000 sites / cel. Antagonisten gebonden aan de prazosine bindingsplaatsen met Michaelis-Menten kenmerken, en hun specificiteit was typerend voor alfa 1-adrenerge receptoren. Er werd geen significante wijziging van antagonistbinding waargenomen, noch na verstoring van de cel, noch door de incubatietemperatuur te verlagen tot 4 graden. In intacte cellen bij 37 graden daarentegen waren agonistische competitiecurven ondiep met Hill-coëfficiënten van minder dan 1. De heterogeniteit van prazosinebindingsplaatsen naar (–)-noradrenaline verscheen ook in prazosineverzadigingsexperimenten die in afwezigheid en in aanwezigheid van deze agonist worden uitgevoerd. Na verstoring van de cel namen de EC50-waarden van agonistische competitiecurves af en lagen de Hill-coëfficiënten dicht bij 1. Toen de temperatuur van 37 graden naar 4 graden werd verlaagd, nam de affiniteit voor (–)-noradrenaline in intacte cellen dramatisch toe met 10.000 keer en de Hill-coëfficiënt van de concurrentiecurve was gelijk aan eenheid. Deze affiniteitsverschuiving veroorzaakt door de temperatuur was niet zo belangrijk in broken-cell preparaten (50 keer).