principalele studii de laborator utilizate în diagnosticul sferocitozei ereditare (HS) includ următoarele:
-
număr complet de celule sanguine
-
număr de reticulocite
-
concentrația medie a hemoglobinei corpusculare (MCHC)
-
frotiu de sânge periferic
-
nivelul lactatului dehidrogenazei (LDH)
-
bilirubină fracționată
-
citometria în flux utilizând testul de legare a eozinei-5′ – maleimidei (EMA)
Ektacitometria gradientului Osmotic, deși recunoscută ca tehnică de referință pentru diagnosticul membranei celulelor roșii din sânge (RBC) tulburări, a fost rar utilizat în practica clinică din cauza disponibilității sale limitate. Cu toate acestea, a fost dezvoltată o nouă generație de ektacytometre care pot duce la o utilizare mai largă a acestei tehnici. Această tehnică nu face diferența între HS și anemia hemolitică autoimună (AIHA), dar distinge HS de alte tulburări ereditare ale membranei.
caracteristicile clasice de laborator ale HS includ următoarele :
-
anemie ușoară până la moderată
-
reticulocitoză
-
creșterea MCHC
-
Sferocitele pe frotiul de sânge periferic
-
hiperbilirubinemie
morfologia RBC în HS este distinctivă, dar nu diagnostică. Anizocitoza este proeminentă, iar celulele mai mici sunt sferocite. Spre deosebire de sferocitele asociate cu boala hemolitică imună și leziunile termice, sferocitele HS sunt destul de uniforme ca mărime și densitate. Sferocitele se caracterizează prin următoarele:
-
lipsa de paloare centrală
-
scăderea diametrului corpuscular mediu
-
densitate crescută.
RBC-urile Sferocitare nu sunt specifice HS. Anemia hemolitică autoimună poate produce, de asemenea, sferocitoză, dar această tulburare poate fi exclusă de obicei prin constatări negative la un test antiglobulin direct.
un MCHC crescut este o caracteristică caracteristică a celulelor RBC din HS. Valorile MCHC mai mari decât limita superioară a normalului (35-36%) sunt frecvente. Această creștere a MCHC este rezultatul deshidratării celulare ușoare. Volumul mediu celular (MCV) la pacienții cu HS este de fapt scăzut, probabil din cauza pierderii membranei și a deshidratării celulare.
cel mai sensibil test pentru HS este testarea fragilității osmotice incubate (OFT), care se efectuează după incubarea RBC-urilor timp de 18-24 ore în condiții sterile la 37 C. OFT cu RBC-uri care nu au fost incubate poate demonstra hemoliza celulelor HS la unii pacienți, dar nu este fiabilă. Acest lucru este valabil mai ales pentru nou-născuți, deoarece RBC-urile fetale sunt în general mai rezistente la hemoliza osmotică. Rezultatele incubate sunt de obicei anormale. Stabilitatea eșantionului este esențială pentru OFT, iar probele de sânge nu trebuie refrigerate mai mult de 2 zile înainte de testare.
deși OFT a fost folosit în mod tradițional pentru diagnosticarea HS, este o muncă intensă și consumatoare de timp pentru a efectua. În schimb, orientările actuale recomandă utilizarea citometriei în flux pentru a examina HS.
alte teste de laborator utilizate pentru diagnosticarea HS includ testul de autohemoliză și testul de liză a glicerolului. Acestea sunt rareori utilizate și nu oferă nici un avantaj față de multe ori.
este posibilă caracterizarea ulterioară a leziunii membranare specifice prin căutarea anomaliilor în spectrină, ankirină, palidină sau banda 3. Sodium dodecyl sulfat-polyacrylamide gel electroforeza (SDS-PAGE) poate detecta proteina defect în cele mai multe cazuri; acest lucru poate fi util pentru a distinge HS de alte tulburări hematologice care pot imita, cum ar fi anemia diseritropoietică congenitală de tip II. cu toate acestea, aceste studii nu sunt efectuate în mod obișnuit și sunt disponibile numai în laboratoare de cercetare selectate.
Ektacitometria cu gradient Osmotic este tehnica de referință pentru diagnosticarea tulburărilor membranei RBC. În această tehnică, un viscozimetru cu difracție laser (ektacitometru) măsoară deformabilitatea eritrocitelor ca funcție continuă a osmolalității mediului în care sunt suspendate. Ektacitometria cu gradient Osmotic distinge HS de alte patologii ereditare ale membranei, dar nu diferențiază HS de anemia hemolitică autoimună.
alte teste sunt indicate la pacienții care au prezentat o criză aplastică. Testarea pentru virusul herpes simplex, parvovirusul B19 și mononucleoza infecțioasă poate ajuta la identificarea unei etiologii infecțioase pentru criza aplastică. Nivelurile de vitamina B12 și folat trebuie măsurate pentru a determina depozitele nutriționale în timpul recuperării după o criză aplastică.
dacă diagnosticul se face târziu în viață, pacienții trebuie să aibă o evaluare a stării lor de fier, mai ales dacă au primit transfuzii frecvente de sânge (de exemplu, din cauza episoadelor hemolitice multiple sau a unui diagnostic inexact) sau suplimentarea orală prelungită cu fier pentru anemie. Această evaluare include măsurarea depozitelor de fier și a nivelurilor serice de feritină. Disfuncția hepatică sau problemele cardiace pot fi prezente la pacienții cu supraîncărcare severă cu fier.
colecistita și colelitiaza sunt complicații frecvente ale HS. Dacă pacientul prezintă semne și simptome de hemoliză pe lângă durerea cvadrantului abdominal superior superior, febră și leucocitoză, trebuie efectuată o ecografie a arborelui biliar.
dacă se sugerează o criză aplastică, trebuie urmărită o evaluare suplimentară a globulelor albe și a trombocitelor. Acest lucru poate necesita o aspirație a măduvei osoase și biopsie pentru a exclude aplazia sau megaloblastoza. Obținerea aspiratului măduvei osoase pentru testare este rareori necesară, cu excepția cazurilor de criză aplastică sau megaloblastică. Rezultatele testelor ajută la evaluarea funcției măduvei și la dezvoltarea descendenței.