de huvudsakliga laboratoriestudier som används vid diagnos av ärftlig spherocytosis (HS) inkluderar följande:
-
komplett blodcellsantal
-
retikulocytantal
-
Genomsnittlig korpuskulär hemoglobinkoncentration (MCHC)
-
perifert blodutstryk
-
laktatdehydrogenas (LDH) nivå
-
fraktionerat bilirubin
-
flödescytometri med eosin-5′ – maleimid (EMA) bindningstest
osmotisk gradient ektacytometri, även om den erkänns som referenstekniken för diagnos av röda blodkroppar (RBC) membran störningar, har sällan använts i klinisk praxis på grund av dess begränsade tillgänglighet. Emellertid har en ny generation ektacytometrar utvecklats som kan resultera i bredare användning av denna teknik. Denna teknik skiljer inte mellan HS och autoimmun hemolytisk anemi (AIHA), men den skiljer HS från andra ärftliga membranstörningar.
de klassiska laboratoriefunktionerna i HS inkluderar följande :
-
Mild till måttlig anemi
-
retikulocytos
-
ökad MCHC
-
sfärocyter på perifert blodutstryk
-
hyperbilirubinemi
RBC-morfologi i HS är distinkt men inte diagnostisk. Anisocytos är framträdande, och de mindre cellerna är sfärocyter. Till skillnad från sfärocyterna associerade med immunhemolytisk sjukdom och termisk skada är HS-sfärocyter ganska likformiga i storlek och densitet. Sfärocyter kännetecknas av följande:
-
brist på central pallor
-
minskad Genomsnittlig korpuskulär diameter
-
ökad densitet.
Spherocytic RBC är inte specifika för HS. Autoimmun hemolytisk anemi kan också producera sfärocytos, men denna störning kan vanligtvis uteslutas genom negativa fynd på ett direkt antiglobulintest.
en ökad MCHC är en karakteristisk egenskap hos RBC-celler i HS. MCHC-värden större än den övre gränsen för normal (35-36%) är vanliga. Denna ökade MCHC är ett resultat av mild cellulär uttorkning. Den genomsnittliga cellvolymen (MCV) hos patienter med HS är faktiskt låg, förmodligen på grund av membranförlust och celldehydrering.
det känsligaste testet för HS är inkuberad osmotisk bräcklighetstestning (OFT), som utförs efter inkubering av RBC i 18-24 timmar under sterila betingelser vid 37 kcal C. ofta med RBC som inte har inkuberats kan visa hemolys av HS-celler hos vissa patienter men är inte tillförlitlig. Detta gäller särskilt för nyfödda, eftersom fetala RBC i allmänhet är mer resistenta mot osmotisk hemolys. Inkuberade ofta resultat är vanligtvis onormala. Provstabilitet är avgörande för OFT och blodprover bör inte kylas i mer än 2 dagar före testning.
även om ofta traditionellt har använts för diagnos av HS, är det arbetsintensivt och tidskrävande att utföra. Istället rekommenderar nuvarande riktlinjer användningen av flödescytometri för att screena för HS.
andra laboratorietester som används för att diagnostisera HS inkluderar autohemolystest och glycerollystest. Dessa används sällan och erbjuder ingen fördel jämfört med ofta.
ytterligare karakterisering av den specifika membranskadan genom att leta efter avvikelser i spectrin, ankyrin, pallidin eller band 3 är möjlig. Natriumdodecylsulfat-polyakrylamidgelelektrofores (SDS-PAGE) kan upptäcka det defekta proteinet i de flesta fall; detta kan vara användbart för att skilja HS från andra hematologiska störningar som kan efterlikna det, såsom medfödd dyserytropoietisk anemi typ II. dessa studier utförs emellertid inte rutinmässigt och är endast tillgängliga i utvalda forskningslaboratorier.
osmotisk gradient ektacytometri är referenstekniken för diagnos av RBC-membranstörningar. I denna teknik mäter en laserdiffraktionsviskometer (ektacytometer) deformerbarheten hos erytrocyter som en kontinuerlig funktion av osmolaliteten hos mediet i vilket de suspenderas. Osmotisk gradient ektacytometri skiljer HS från andra ärftliga membranpatologier men skiljer inte HS från autoimmun hemolytisk anemi.
andra tester indikeras hos patienter som har upplevt en aplastisk kris. Testning för herpes simplexvirus, parvovirus B19 och infektiös mononukleos kan hjälpa till att identifiera en infektiös etiologi för aplastisk kris. Vitamin B12 och folatnivåer bör mätas för att bestämma näringslagren under återhämtning från en aplastisk kris.
om diagnosen ställs sent i livet måste patienterna utvärdera sin järnstatus, särskilt om de har fått frekventa blodtransfusioner (t.ex. på grund av flera hemolytiska episoder eller en felaktig diagnos) eller långvarig oral järntillskott för anemi. Denna utvärdering inkluderar mätning av järnbutiker och serumferritinnivåer. Leverdysfunktion eller hjärtproblem kan förekomma hos patienter med svår järnöverbelastning.
cholecystit och kolelithiasis är vanliga komplikationer av HS. Om patienten uppvisar tecken och symtom på hemolys utöver högra övre bukkvadrantsmärta, feber och leukocytos, bör en ultraljud av gallträdet utföras.
om en aplastisk kris föreslås bör ytterligare utvärdering av vita blodkroppar och blodplättar fortsätta. Detta kan kräva en benmärgsaspiration och biopsi för att utesluta aplasi eller megaloblastos. Att få benmärgsaspirat för testning är sällan nödvändigt utom i fall av aplastisk eller megaloblastisk kris. Testresultat hjälper till att utvärdera märgfunktionen och utvecklingen av linjen.