Abstrakt
Alfa 1-Adrenergní receptory nonfusing svalové buňky linie (BC3H1) byly identifikovány na neporušenou a rozbité-mobilní přípravy pomocí high-affinity antagonista prazosin. V intaktních buňkách dávaly rovnovážné i kinetické studie hodnoty KD v rozmezí 0,07-0,12 nM. Maximální počet vazebných míst stanovených Scatchardovou analýzou byl asi 85,000 +/- 9,000 weby / buňka. Antagonisté vázán na prazosin vazebná místa s Michaelis-Menten vlastnosti, a jejich specifičnost byla typická alfa 1-adrenergní receptory. Žádná významná modifikace vazby antagonistů nebyla pozorována ani po narušení buněk, ani snížením inkubační teploty na 4 stupně. V porovnání, v intaktních buňkách při 37 stupně, agonistické soutěžní křivky byly mělké s Kopcovými koeficienty menšími než 1. Různorodost prazosin vazebná místa směrem (–)-noradrenalinu také se objevil v prazosin nasycení experimenty provádí v nepřítomnosti a v přítomnosti agonisty. Po narušení buněk, hodnoty EC50 křivek agonistické konkurence se snížily a koeficienty kopce byly Blízko 1. Když byla teplota snížena z 37 stupňů na 4 stupně, afinita k (–)- norepinefrinu v intaktních buňkách se dramaticky zvýšila o 10 000krát a koeficient kopce soutěžní křivky se rovnal jednotě. Tento afinitní posun vyvolaný teplotou nebyl u přípravků s rozbitými buňkami (50krát) tak důležitý.