Abstract
alfa 1-adrenerge receptorer af en nonfusing muskelcellelinie (BC3H1) er blevet identificeret på intakte og brudte cellepræparater ved anvendelse af højaffinitetsantagonisten prasosin. I intakte celler gav både ligevægt og kinetiske undersøgelser KD-værdier i området 0,07-0,12 nM. Det maksimale antal bindingssteder bestemt ved Scatchard-analyse var omkring 85,000 +/- 9,000 steder / celle. Med Michaelis-Menten egenskaber, og deres specificitet var typisk for alfa 1-adrenerge receptorer. Ingen signifikant modifikation af antagonistbinding blev observeret hverken efter celleforstyrrelser eller ved at sænke inkubationstemperaturen til 4 grader. I modsætning, i intakte celler ved 37 grader, agonistkonkurrencekurver var lavvandede med Bakkekoefficienter på mindre end 1. Heterogeniteten af prasosinbindende steder mod (–)- norepinephrin optrådte også i prasosinmætningseksperimenter udført i fravær og i nærvær af denne agonist. Efter celleforstyrrelser faldt EC50-værdierne for agonistkonkurrencekurver, og Bakkekoefficienterne var tæt på 1. Når temperaturen blev sænket fra 37 grader til 4 grader, steg affiniteten for (–)-norepinephrin i intakte celler dramatisk med 10.000 gange, og Bakkekoefficienten for konkurrencekurven var lig med enhed. Dette affinitetsskift induceret af temperatur var ikke så vigtigt i brudte cellepræparater (50 gange).