medlemskab og aktiviteter
Opus Dei krævede oprindeligt Nye medlemmer at aflægge et løfte om lydighed og kyskhed. Siden organisationen blev en prelatur, har den imidlertid kun krævet en kontraktlig forpligtelse til at modtage åndelig dannelse, som inkluderer ugentlige klasser (“cirkler”) og en årlig religiøs tilbagetog, blandt andre aktiviteter. Medlemmer praktiserer ofte selvopofrelse, som kan omfatte faste og afholdenhed fra visse fornøjelser, og selvdødelæggelse, såsom iført en cilice (som ofte har form af en Pigget kæde, der bæres omkring overlåret), frarådes ikke. Nye medlemmer tjener en prøvetid, der varer mindst fem år, før de er fuldt optaget. Nogle medlemmer af Opus Dei, kaldet numeraries, bruger meget af deres tid til organisationen. Ligesom præster er de forpligtet til at forblive ugifte og celibate, men de lever i verden og forfølger sekulære erhverv. Flertallet af medlemmerne, imidlertid, er supernumerarierne, der er fri til at gifte sig, bidrage økonomisk til Opus Dei, og demonstrere Kristen dyd i deres daglige aktiviteter. Gruppen er også økonomisk bistået af samarbejdspartnere, som ikke er medlemmer og, med tilladelse fra Pavestolen, behøver ikke engang at være kristne. Ordinerede præster udgør kun en lille procentdel af organisationen; i 2016 nummererede de omkring 2.100 af de næsten 95.000 medlemmer over hele verden.
organisationen har etableret erhvervs -, handels -, hjemmekunst-og landbrugscentre i forskellige dele af verden, adskillige gymnasier, erhvervsskoler og velgørende aktiviteter. Opus Dei grundlagde også og gav (med statsstøtte) universitetet i Navarra, som af mange betragtes som Spaniens fineste Universitet, og driver det pavelige universitet for Det Hellige Kors i Rom og Universitetet i Piura i Peru.