Figur 3: ICC med Drosha antistoff (ab12286)
Humane kvinnelige amniocytter immunisert Med Drosha (FITC) (1/25 fortynning). DNA er merket rødt med propidiumjodid.
RISC og RITS
Studier i fisjon gjær (Schizosaccharomces pombe) har vist at sentromere silencing (prosessen med silencing transgener som integreres i sentromere gjenta regioner) krever komponenter Av rnai veien og derfor i dette tilfellet silencing opererer på transkripsjonsnivå (Ekwall 2004; Verdel and Moazed 2005).
effektorkomplekset i fisjonsgjær ser ut til å være forskjellig FRA RISC. sirnaer er inkorporert i stedet i et kompleks kalt RITS (RNA-indusert Initiering Av Transkripsjonell Gendeaktivering). RITS består av et kromodomainprotein (Chp1), Argonaute 1 (Ago1), et protein med ukjent funksjon, Tas3, samt siRNA-molekyler.
RITS mål spesifikke kromosomale områder for silencing gjennom produksjon av en repressiv kromatinstruktur kjent som heterochromatin gjennom histonmetylering.
Sammendrag
RNAi mediert ved innføring av lang dsRNA har blitt brukt til å undersøke genfunksjon i en rekke organismer, inkludert planter og Drosophila, men denne tilnærmingen kan ikke brukes på pattedyrceller da introduksjonen av dsRNA lengre enn 30 nukleotider induserer en ikke-spesifikk interferonrespons (antiviral respons), noe som resulterer i nedbrytning av mRNA og forårsaker også en global hemming av mRNA-oversettelse.
for å omgå disse problemene kan kjemisk syntetiserte siRNA-molekyler som etterligner Dicer-produkter brukes til å undersøke genfunksjon hos pattedyr.
alternativt kan plasmid-vektorer designet for å produsere korte hårnål rna-molekyler utnyttes for å indusere gendeaktivering i pattedyrsystemer. Dermed kan det i fremtiden være mulig å behandle menneskelige sykdommer ved å slå av genuttrykk ved å styre nedbrytningen av spesifikk mRNA.
Se alle rna-interferensressurser.