isolatie en uitbreiding op lange termijn van primaire cellen, in het bijzonder stam/voorloperpopulaties, zijn fundamentele en belangrijke basistechnieken op verschillende biologische gebieden, waaronder ontwikkelingsbiologie en stamcelbiologie, en medische wetenschap. De cellen in gelaagde en zuilvormige epitheliaale weefsels zijn hoogst regeneratief en onevenredig verantwoordelijk voor vele menselijke kanker; nochtans, wordt het klonen van volwassen stamcellen beperkt door moeilijkheden in het handhaven van deze cellen in een onrijpe staat. In de afgelopen jaren, hebben de technische innovaties in snelle en dramatische vooruitgang in de biologie van de stamcel, zoals het gebruik van kleine molecules en de groeifactoren geleid om de milieu ‘ s van het weefselniche na te bootsen en “Organoid cultuur” te vergemakkelijken .
in 1975 vormden Rheinwald en Green het eerste succesvolle voorbeeld van menselijke volwassen stamcelkweek met behulp van menselijke keratinocyten . Specifiek, hielden zij menselijke keratinocytes op lange termijn in combinatie met een sublethally bestraalde muis fibroblast cellijn, 3T3-J2. Hoewel zij de term “stamcellen” niet gebruikten voor gekloonde keratinocyten die op 3T3-cellen worden gekweekt, vonden Green en collega ‘ s kolonies met de opmerkelijke capaciteit om nieuwe kolonies na passage te verdelen en te vormen, die zij “Holoclones” noemden . Deze holoclones bestaan uit kleine, onrijpe cellen die allen het intense nucleaire bevlekken met p63, een hoofdregelgever van stamness, in gelaagde epitheliaale cellen tentoonstelden . In het gelaagde epitheel, waaronder huid, long bronchia, borstklier en blaas urotheel, was de stamcelpopulatie voornamelijk gelokaliseerd in de basale laag en werden onvolgroeide cellen gekleurd met p63, in overeenstemming met de in vitro studies . Beduidend, zijn geà soleerde en uitgebreide menselijke keratinocytes van autologe huid met succes geënt om patiënten te branden en geregenereerd een permanente epidermis die lijken op die het gevolg zijn van Split-dikte huid Enten . Met name, is dezelfde procedure toegepast om menselijke corneale epitheliale cellen voor transplantatie te isoleren en uit te breiden . Hoewel deze technologie op dat moment beperkt was tot stamcellen in de epidermis en het hoornvlies, creëerden Green en collega ‘ s de basis voor het klonen van menselijke volwassen stamcellen op het gebied van fundamentele biologie en regeneratieve geneeskunde.
in dit overzichtsartikel geven we een overzicht van recente onderzoeksvoortgang en accumuleren we bewijs van een celcultuursysteem dat heeft geleid tot technische doorbraken in epitheliale celtechnologieën. De nieuwe cultuurstrategieën voor zowel gestratificeerde epitheliaale cellen als zuilvormige epitheliaale cellen hebben menselijke epitheliaale ontwikkeling toegelaten om worden samengevat en kunnen worden gebruikt om een menselijk ziektemodel in vitro te produceren. We bespreken ook de potentiële en mogelijke toepassingen van normale epitheliale celcultuurtechnologieën voor Regeneratieve Geneeskunde en benadrukken een kankercelcultuursysteem dat individuele patiëntfenotypen reproduceert.
gestratificeerde epitheliale celcultuur
in gestratificeerde epitheliale weefsels, met inbegrip van glandulair en pseudogestratificeerd epitheel, kunnen p63+-cellen, die gelokaliseerd zijn op het keldermembraan, zichzelf vernieuwen om stam – /voorloperpopulaties in stand te houden en nakomelingen veroorzaken die functionele weefsels vormen . Zoals hierboven vermeld, zijn het klonen en de uitbreiding van epitheliaale stamcellen, zoals huidkeratinocyten en corneale epitheliaale cellen, goed gevestigd in co-kweeksystemen met doorstraalde muis 3T3-J2 fibroblasten. Nochtans, is dit standaardprotocol grotendeels beperkt tot de cultuur op lange termijn van keratinocytes en hoornvliescellen. Niettemin, zijn gekloonde stamcellen van thymic epithelia gemeld, evenals de isolatie van thymic epithelial stamcellen van diverse species, met inbegrip van menselijke cellen, gekweekt met een 3T3-voedersysteem . Verder hebben Frey en collega ‘ s onlangs de 3T3 feeder methode toegepast om urotheliale stamcellen te isoleren die sonische egel tot expressie brachten en in de basale laag van de blaas urotheel verbleven . Deze urotheliale stamcellen uit geïsoleerd menselijk en varkensweefsel werden stabiel gekweekt op een 3T3-voederlaag en konden leiden tot meerdere cellijnen, waaronder P63+ basale cellen en Uroplakin 2+ en 3+ urotheliale cellen, na niercapsuletransplantatie bij naakte muizen. In 2011, Pooja et al. benut het 3T3-cultuursysteem om drie soorten menselijke epitheliale stamcellen van de luchtweg te isoleren, d.w.z., nasale, tracheale en distale luchtweg stamcellen, en vond dat deze luchtweg epitheliale stamcellen vertonen verschillende cellulaire fenotypen na in vitro differentiatie, hoewel de onrijpe stamcel klonen morfologisch niet te onderscheiden (Fig. 1) . In een follow-up studie, toonde de transplantatie van muis tracheale en distale luchtweg epitheliale stamcellen aan dat distale luchtweg stamcellen gemakkelijk werden opgenomen in H1N1 influenza-beschadigd longweefsel en gedifferentieerd in meerdere epitheliale celtypes, d.w.z. bronchiolen en longblaasjes, terwijl getransplanteerde tracheale stamcellen alleen gelokaliseerd werden in de belangrijkste luchtwegen . Clonogene stamcellen werden ook geà soleerd uit menselijke slokdarm endoscopische biopsiesteekproeven, en deze cellen konden goed onderscheiden, gelaagde plaveiselachtige epithelia-achtige structuren vormen in een lucht vloeibare interface (ALI) cultuursysteem .
schema van het proces van de celcultuur voor menselijke gestratificeerde en zuilvormige epitheliale stamcellen op een 3T3-laag van de muizenvoeder. Voor gestratificeerde epitheliale stamcellen, worden zij geà soleerd van biopsie of worden de chirurgische specimens geplateerd op een 3T3 laag voor een cultuur op lange termijn. Voor zuilvormige epitheliale stamcellen, worden zij geplateerd op een 3T3 laag met bepaalde factoren die voor de groei en het onderhoud van de stamcel essentieel zijn. Morfologisch onrijpe kolonies (verpakte kolonies met kleine cellen) van epitheliale stamcellen worden mechanisch opgepikt voor verdere homogene expansie. In de ALI cultuur, ondergaan de cellen differentiatie in Rijpe celtypes in Transwell
Schlegel en collega ‘ s meldden dat een Rho-geassocieerde proteïne kinase (ROCK) inhibitor in combinatie met 3T3-voedercellen de proliferatieve capaciteit van epitheliale stamcellen, met inbegrip van menselijke keratinocyten, prostate cellen, en borstkliercellen, beduidend verhoogde, en zij noemden dit fenomeen “voorwaardelijke herprogrammering” . De capaciteit om epitheliaale stamcelculturen van patiënten efficiënt te produceren verstrekt kritische en waardevolle inzichten in cel-gebaseerde diagnostiek en therapeutiek . Meer recent, toonden Rajagopal en collega ‘ s aan dat de tgfß/BMP/SMAD signalerende weg belangrijk is in diverse epitheliale weefsels, met inbegrip van ectoderm-afgeleide huid en borstklierweefsel, endoderm-afgeleide slokdarm en prostaatweefsel, en mesoderm-afgeleide epididymis. Zij ontdekten dat de dubbele remming van SMAD-signalering (het BMP-signaal werd geblokkeerd door DMH-1 en het tgfß-signaal werd geremd door A-83-01) De stabiele voortplanting van menselijke en muisepitheliale basale celpopulaties vergemakkelijkte. Verrassend genoeg maakte de dubbele remming van TGFß/BMP de robuuste uitbreiding van epitheliale stamcellen mogelijk zonder de noodzaak voor Muis 3T3-voedercellen.
gezamenlijk kunnen deze technische vooruitgang, in combinatie met kleine moleculen en feedercellen, worden gebruikt om in vitro gestratificeerde epitheliale stam – /voorloperpopulaties continu en efficiënt uit te breiden. Een andere doorbraak in gestratificeerde epitheliaale cultuur, organoid cultuur, is gebruikt om zowel basale als Luminal menselijke prostaat progenitors uit te breiden. Deze menselijke luminale voorlopercellen waren multipotente en vormden prostaatklierachtige structuren in vitro . Nochtans, het produceren van driedimensionale structuren die uit gestratificeerde of pseudostratificeerde epithelia bestaan om authentieke in vivo architectuur te recapituleren blijft uitdagend, hoewel vele onderzoekers sferoid en organoid culturen hebben gerapporteerd. Dit probleem kan worden opgelost door een methode vast te stellen om zelforganisatie te vergemakkelijken, zoals uitgevoerd in pluripotent stamcel-afgeleide weefsels .
kolomvormige epitheliale celcultuur
hoewel intestinale stamcellen de opmerkelijke capaciteit bezitten om zich met een hoge omzetsnelheid te vermenigvuldigen om de intestinale epithelia in stand te houden, en hepatocyten zeer regeneratief zijn als reactie op schade, is het vermogen om stamcelpopulaties van kolomvormige epitheliale cellen te klonen ernstig beperkt, vermoedelijk als gevolg van een gebrek aan weefselnichesignalen in vitro. In de afgelopen tien jaar ontdekten Clevers en collega ‘ s LGR5 (leucine-rich repeat-containing G-protein coupled receptor 5), een intestinale stamcelmarker, in een verfijnd muismodel (lgr5-EGFP-ires-CreERT2 muizen gekruist met de Cre-geactiveerde Rosa26 LacZ reporter) en vestigden een muis intestinale organoïde kweekmethode die bestaat uit villus-achtige structuren en crypt-achtige zones met meerdere intestinale celtypen . In combinatie met groeifactoren en cocktails van kleine moleculen werd een geïsoleerde lgr5+ stamcelfractie in Matrigel gesuspendeerd en op lange termijn gekweekt . Het wijzigen van de kweek voorwaarde met het gebruik van nicotinamide, een P38 en TGFß receptor remmer, menselijke epitheliale cellen geïsoleerd uit de dunne darm en dikke darm waren in staat om oneindig uit te breiden op lange termijn in vitro . Deze techniek is van toepassing op cultuur andere soorten cellen, zoals pancreatische ductcellen en hepatocytes , en vergemakkelijkt revolutionaire vooruitgang in zuilvormige epitheliale celcultuur.
Organoid culture maakt gebruik van een op Matrigel gebaseerd 3D-Cultuurplatform en kan uitgebreid worden gebruikt om diverse soorten volwassen epitheliale cellen, waaronder gestratificeerde epitheliale cellen, met stam/voorlopercelpopulaties stabiel te cultiveren . Nochtans, is de capaciteit om snel en efficiënt een fractie eenvormige stamcellen in vitro te verspreiden ook nuttig en belangrijk voor de gedetailleerde studie van zelf-vernieuwing en lotspecificatie in weefselstamcellen en mogelijke toekomstige toepassingen van celtransplantatie voor regeneratieve geneeskunde. Xian en collega ‘ s ontwikkelden onlangs een nieuw cultuursysteem voor de homogene expansie van menselijke foetale intestinale stamcellen, waaronder dunne darm-en coloncellen. Dit systeem gebruikte een 3T3 muizenvoeder laag in combinatie met groeifactoren en signaalweg inhibitors om menselijke zuilvormige epitheliale stamcellen robuust uit te breiden (Fig. 1) . Bovendien, meer dan 50% van de intestinale stamcellen gekweekt op 3T3 fibroblasten waren in staat om kolonies te vormen. In de darm van zoogdieren, zijn de gedefinieerde nichefactoren, zoals WNT en de signalen van de inkeping, essentieel voor het regelen van de stamheid van intestinale stamcellen bij de cryptbasis. Bovendien, Paneth cellen, die ook bij de crypt basis worden gevestigd, voortvloeien uit stamcellen en handelen als het gebied van de stamcel door essentiële factoren op een paracrine manier te verstrekken. Omdat organoid culturen bestaan uit stamcellen en diverse derivaten, zoals Paneth cellen, worden niche factoren autonoom geleverd . Daarentegen, omdat een zuivere populatie van intestinale stamcellen op een 3T3-voederlaag wordt gekweekt, kunnen de cellen nichefactoren niet afscheiden. Daarom moeten extrinsieke factoren die nichefactoren lijken worden aangevuld. Naast het onderhoudsprotocol van de stamcel, is een differentiatieprotocol gevestigd in een ali cultuurmodel om tot minstens vier types van belangrijke intestinale cellen, d.w.z., Paneth cellen, entero-endocriene cellen, kelk cellen, en enterocytes (intestinale absorptieve cellen) te leiden . De vorming van darmvillusachtige structuren werd waargenomen volgens de oorspronkelijke weefseltypen, zoals dunne darm-en darmweefsels (Fig. 1). In een andere ALI cultuur benadering, Kuo en collega ‘ s robuust gekweekt kleine stukjes van de muis neonatale darm met een stromale element lange termijn .
dezelfde strategie werd ook toegepast op kloon van menselijke maagstamcellen verkregen door endoscopische biopsie. Specifiek, werden clonogenic maagcellen stabiel uitgebreid op een 3T3-voederlaag in combinatie met groeifactoren en kleine molecules en in maagepitheliaale lijnen die typisch in de maag worden gevonden, zoals pepsinogeen-uitdrukkende hoofdcellen worden onderscheiden . Naast gekloonde stamcellen van het spijsverteringsorgaan, waren ovidict-stamcellen uit de distale baarmoeder ook in staat om zich oneindig voort te planten op een 3T3-voederlaag in aanwezigheid van nichefactoren . De distale oviduct, fimbria epitheel, is een eenvoudige zuilvormige epitheel laag die bestaat uit de volgende twee soorten cellen: ciliated cellen, die het transport van gameten verbeteren, en secretoire cellen, die slijm afscheiden. Gebruikend een lichte wijziging van het differentiatieprotocol voor intestinale stamcellen, gaven de ALI-gekweekte ovidictal stamcellen op lange termijn aanleiding tot een 3D architectuur, die zowel ciliated als secretoire cellen bevatten, die aan de in vivo epitheelstructuur deed denken . De capaciteit om epitheliaale geslachten met juiste celtypes van een stamcelpopulatie te produceren zou een nuttig hulpmiddel kunnen zijn om fysiologische epitheliaale ontwikkeling en homeostase te bestuderen en scherpe en chronische ziektemodellen in vitro te ontwikkelen.
Kankercelkweek
sinds de eerste kankercellijn, de HeLa-cellijn, werd vastgesteld bij een baarmoederhalskanker-patiënt in 1951, werden kankercellijnen die werden vastgesteld bij een grote verscheidenheid aan kankertypes op grote schaal gebruikt om de pathobiologie van kanker te bestuderen en boden zij mogelijkheden om in vivo xenotransplantatiemodellen te genereren en antikankermedicijnen in vitro en in vivo te testen. Hoewel er enorme vooruitgang is geboekt in kankerbiologie met behulp van kankercellijnen, weerspiegelen de resultaten die worden verkregen met behulp van deze cellen mogelijk niet voldoende de complexiteit van de ziekte zoals oorspronkelijk verwacht, omdat kanker interpatient en intratumor heterogeniteit vertoont, zoals blijkt uit recente vooruitgang in de volgende generatie sequencing . Om meer precies te reflecteren kanker fenotypen, met inbegrip van de patiënt gen mutatie status en pathologie, Welm en collega ‘ s ontwikkelden patiënt-afgeleide xenograft (PDX) modellen van borstkanker in nonobese diabetische ernstige gecombineerde immunodeficiëntie (NOD-SCID) muizen die onderhouden de essentiële kenmerken van de oorspronkelijke tumoren en tentoongesteld gemetastaseerd capaciteit op specifieke websites . Naast het borstkankermodel , toonde de oprichting van verschillende soorten vaste tumoren de haalbaarheid van PDX-modellen aan, die naar verwachting het preklinisch testen van nieuwe kankertherapieën zullen versnellen en het doel van “gepersonaliseerde geneeskunde”zullen helpen realiseren.
kweekmethoden voor volwassen stamcellen, zoals organoïde-en voedersystemen, zijn ook van toepassing op verschillende benaderingen waarbij van patiënten afgeleide kankercellen worden gebruikt. Specifiek , meldden Clevers en collega ‘ s dat organoid cultuur kan worden gebruikt om alvleesklier , prostaat, en colorectal kanker te modelleren en toonden aan dat de originele kankereigenschappen, met inbegrip van genetische heterogeniteit en druggevoeligheid, kunnen worden samengevat. Daarom noemden ze dit systeem een “levende organoid biobank”. Deze technologieën kunnen ook worden gebruikt om een stamcelpopulatie te isoleren van een precancerous laesie, zoals Barrett ‘ s slokdarm, een voorloper van menselijk slokdarm adenocarcinoom . Geïsoleerde en uitgebreide Barrett ‘ s slokdarm stamcellen werden getransformeerd door de introductie van SV40 grote T antigeen, hTERT, en c-myc en xenotransplanteerd in immunogecompromitteerde NSG (Nod.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ) muizen . Zoals verwacht, Barrett ‘ s slokdarm stamcellen omgezet in slokdarm adenocarcinoom-achtige tumoren in muizen. Een soortgelijke benadering toonde aan dat menselijke ovidictale stamcellen de cel van oorsprong waren bij hooggradige sereuze ovariale epitheliale kanker . Deze bevinding bevestigt recente menselijke pathologie en het transgene muismodel bewijs, dat erop wees dat het distale oviductale epitheel het weefsel van oorsprong voor deze kanker is . In combinatie met het CRISPR/Cas9-systeem, werden de normale cellen van de colonstam opeenvolgend getransformeerd door de bestuurdersmutaties te introduceren die vaak in colorectal kanker worden ontdekt . De resulterende cellen mochten xenografts in de niercapsule vormen en vertoonden progressieve transformatie in adenocarcinoom-achtige fenotypes die door invasieve en metastatische eigenschappen worden gekenmerkt. Globaal, vergemakkelijkt de capaciteit om cellen van tumor – en patiënt-aangepaste normale epitheliaale weefsels te isoleren en te kweken de productie van een platform dat niet alleen klassiek in vivo dierlijk werk op het gebied van kankerbiologie aanvult maar ook patiënt-specifieke genetica en genomicsbenaderingen in vitro vergemakkelijkt.
het modelleren van inflammatieziekte met volwassen stamcellen
het modelleren van ziekte bij de mens wordt belemmerd door de beperkte toegankelijkheid van zieke weefsels bij de mens. Niettemin hebben de vooruitgang in de volwassen stamcelkweek ons in staat gesteld om ziektefenotypen in vitro te reproduceren door stamcellen uit te breiden en volwassen celtypes uit kleine menselijke biopsiemonsters te halen. Omdat de 3D cultuurmethodes, zoals ALI en organoid cultuur, structuren verstrekken die uit veelvoudige celtypes bestaan en op de in vivo waargenomen epitheelarchitectuur lijken, zouden zij voor het bestuderen van ontstekingsziekten, met inbegrip van besmettelijke en erfelijke ziekten geschikt moeten zijn. Specifiek, het reproduceren van de ziekte fenotype is eenvoudig wanneer de ziekteverwekker (of belangrijkste oorzaak) en gerichte celtype bekend zijn.Pseudomembraneuze colitis (PMC) wordt veroorzaakt door een disproportioneel toegenomen populatie Clostridium difficile (C. difficile) na behandeling met antibiotica. C. difficile is een Gram-positieve, sporenvormende bacterie, en produceert de hoogmoleculaire-gewicht toxines tcda en TcdB, die vloeistof secretie induceren, ontsteking, en dikke darm weefsel schade. De epitheliaale cellen van de dikke darm onderscheiden van clonogenic colonic stamcellen in ALI cultuur werden uitgedaagd met deze toxines, die verwoestende epitheliaale schade op een tijd – en dosis-afhankelijke manier veroorzaakten. Dit resultaat gaf aan dat het 3D cultuurmodel kan worden gebruikt om C. difficile pathologie te vertegenwoordigen . Op dezelfde manier werd het effect van Helicobacter pylori (H. pylori) infectie, die chronische gastritis, maagzweren en kanker veroorzaakt, bestudeerd door H. pylori micro-injectie in organoïde culturen. Met bacteriën geïnfecteerde organoidculturen vertoonden een verhoogde ontsteking, zoals NF-kB-activering en IL8-inductie, en IL8-expressie was significant hoger in organoidculturen van het kliertype dan in organoidculturen van het pit-type .
volwassen stamcellen zijn ook gebruikt om erfelijke ziekten te modelleren. Beekman en collega ‘ s meldden een intestinale organoid cultuur afgeleid van cystic fibrosis (CF) patiënten. CF wordt veroorzaakt door mutaties in de cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR), die normaal gesproken tot uiting komt in de epitheliale cellen van veel organen, zoals Long-en spijsverteringsweefsels. Hoewel normale intestinale organoid culturen vertonen robuuste zwelling in reactie op Forskolin, de zwelling reactie werd niet waargenomen in CF organoid culturen . Bovendien, toen de gemuteerde CFTR locus werd gecorrigeerd met behulp van de CRISPR/Cas9 technologie in intestinale organoïden van CF patiënten, werd aangetoond dat de gecorrigeerde genen functioneel werken . Daarom biedt in vitro differentiatie van volwassen stamcellen, die lijken op in vivo fenotypen met meerdere celtypen in combinatie met Gen-editingtechnologieën, krachtige middelen voor de behandeling van menselijke ziekte en kan direct inzicht in de menselijke pathologie bieden.
toepassing van epitheliale stamcellen voor regeneratieve geneeskunde
ondanks veelbelovende strategieën die gebruik maken van menselijke embryonale stamcellen en geïnduceerde pluripotente stamcellen (iPS) voor toepassingen in de regeneratieve geneeskunde, zijn er weinig klinische proeven van deze strategieën aan de gang, wat deels te wijten is aan moeilijkheden in de afstamspecificatie en de mogelijkheid van tumorigenese. Omdat de volwassen stamcellen hoofdzakelijk aan specifieke weefseltypes worden geëngageerd, is het produceren van bedoelde celtypes vrij gemakkelijk, en is het potentiële risico voor tumorigenesis laag. Aldus, streven de therapeutische benaderingen om volwassen stamcellen als celbron voor transplantatie te gebruiken. Hoewel Green en collega ‘ s de menselijke keratinocyte cultuurmethode in 1975 vaststelden en de gekweekte cellen transplanteerbaar waren in patiënten met brandwonden of chemische verwondingen, was de teelt op lange termijn van andere soorten volwassen stamcellen onderworpen aan significante technische barrières. Zoals hierboven beschreven, hebben de recente technische vooruitgang deze beperking voor diverse types van epitheliaale cellen overwonnen. Vandaar, is de capaciteit om de populaties van de stamcel snel en efficiënt uit te breiden waardevol voor hun gebruik in regeneratieve geneeskunde.
bijvoorbeeld, muis lgr5 + Colon stamcellen zijn uitgebreid in organoid cultuur en getransplanteerd in de beschadigde muis colon, en geëngraveerde cellen die in staat waren om zichzelf te vernieuwen en gedifferentieerd werden gedetecteerd, zelfs na 25 weken . In een andere benadering, gebruikten Zhang K en collega ‘ s gemanipuleerde volwassen stamcellen voor een transplantatiestudie. Eerst, hebben zij met succes de cellen van het hoornvlies epitheliaale in een schotel zonder voedercellen gekweekt en toen gevonden dat Pax6 een zeer belangrijke transcriptiefactor is die de cellen van de hoornvlies stam (CSCs) van huidkeratinocytes onderscheidt. Verrassend, pax6-overexpressie in keratinocyten veroorzaakte limbale stamcel-achtige cellen, en deze cellen konden in de gewonde hoornvliezen van konijnen worden getransplanteerd . Omdat keratinocytes gemakkelijker toegankelijk zijn dan CSCs, kan deze methode voor de behandeling van menselijke oogziekte van toepassing zijn. Meer recent, Liu et al. rapporteerde een aantrekkelijke benadering voor weefselherstel en regeneratie die endogene stamcellen gebruikte. In hun studie, lens epitheliale stamcellen (LECs) die pax6 en Bmi1 uitgedrukt werden gekarakteriseerd en tentoongesteld regeneratieve potentieel in vivo. Een chirurgische cataract verwijderingsmethode die endogene Lec ’s bewaart werd gebruikt, en deze Lec’ s droegen bij aan de spontane regeneratie van lenzen met visuele functie bij konijnen, makaken en menselijke zuigelingen. Deze methode zou een therapeutische doorbraak voor cataractbehandeling kunnen zijn en mogelijk kunstmatige intraoculaire lensimplantatie kunnen vervangen .
vanwege de hoge omzetcijfers van veel epitheliale cellen is het transplanteren van stamcelpopulaties essentieel voor langdurige weefselonderhoud. Theoretisch, kan één enkele stamcel gehele weefsels reconstitueren, en verscheidene onderzoeksgroepen demonstreerden empirisch dit begrip . Ondanks het potentieel van pluripotente stamcellen (PSCs), die tot alle celtypes kunnen leiden, kunnen PSC-afgeleide weefselstamcellen waarschijnlijk niet in de onrijpe staat in vitro worden gehandhaafd. Daarom is het gebruik van volwassen stamcellen voor regeneratieve geneeskunde een belangrijk voordeel.