3. ábra: ICC Drosha antitesttel (ab12286)
humán női amniociták, amelyeket Drosha-val (FITC) immunszaporítottak (1/25 hígítás). A DNS-t piros színnel jelölik propidium-jodiddal.
RISC és RITS
a hasadási élesztőben (Schizosaccharomces pombe) végzett vizsgálatok kimutatták, hogy a centromer hangtompítás (a centromer ismétlődő régiókba integrálódó transzgének hangtompításának folyamata) az RNAi útvonal komponenseit igényli, ezért ebben az esetben a hangtompítás transzkripciós szinten működik (Ekwall 2004; Verdel and Moazed 2005).
úgy tűnik, hogy a hasadási élesztőben lévő effektor komplex különbözik a RISC-től. az siRNS-eket ehelyett egy komplexbe építik be RITS (a transzkripciós géncsendesítés RNS-indukált Iniciációja). A RITS tartalmaz egy kromodomain fehérjét (Chp1), Argonaute 1 (Ago1), ismeretlen funkciójú fehérjét, Tas3, valamint siRNS molekulák.
a RITS specifikus kromoszómális területeket céloz meg a hangtompításhoz hiszton-metilezés útján heterokromatin néven ismert elnyomó kromatinszerkezet előállításával.
Összefoglalás
a hosszú dsrns bevezetése által közvetített RNS-t számos organizmus génfunkciójának vizsgálatára használták, beleértve a növényeket és a Drosophilát is, azonban ez a megközelítés nem alkalmazható emlős sejtekre, mivel a 30 nukleotidnál hosszabb dsrns bevezetése nem specifikus interferon választ (vírusellenes választ) vált ki, ami az mRNS lebomlását eredményezi, és az mRNS transzláció globális gátlását is okozza.
ezeknek a problémáknak a megkerülésére kémiailag szintetizált siRNS molekulák, amelyek utánozzák a Dicer termékeket, felhasználhatók Emlősök génfunkciójának vizsgálatára.
Alternatív megoldásként a rövid hajtű RNS molekulák előállítására tervezett plazmidvektorok felhasználhatók géncsendesítés indukálására emlős rendszerekben. Így a jövőben megvalósítható lehet az emberi betegségek kezelése a génexpresszió leállításával a specifikus mRNS lebomlásának irányításával.
Lásd az összes RNS interferencia erőforrást.