introduktion: Trombingenerering (TG) bedömer en individs hemostatiska kapacitet och indikerar en persons blödnings-och trombosrisk. TG berorpå balansen mellan pro – och antikoagulantprocesserna i koagulationsplasma. Nyligen utvecklade vi en metod för att studera de viktigaste pro-och antikoagulantprocesserna på grundval av TG, kallad trombindynamikmetoden. Vitamin K-antagonist (VKA) behandling är känd för att minska TG och att minskningen av TG korrelerar med international normalized ratio (INR). I denna studie syftar vi till att undersöka effekten av VKA-terapi på dynamiken i TG genom att undersöka protrombinomvandling och trombininaktivering.
material och metoder: TG mättes i trombocytfattig plasma vid 1 pM vävnadsfaktor hos 129 friska försökspersoner och 129 patienter behandlade med VKA. Patienterna klassificerades enligt INR-värdet: INR<2 (n=17), 2<INR<3 (n=55), 3<INR<4 (n=38) och INR> 4 (n=19). Trombindynamiken beräknades från TG-kurvor och plasma-antitrombin (AT), 2-makroglobulin (a2M) och fibrinogennivåer. Tre trombindynamikparametrar bestämdes: den totala mängden protrombinomvandling (PCtot), den maximala hastigheten för protrombinomvandling (PCmax) och trombinförfallskapaciteten (TDC) för varje plasmaprov.
resultat: k-vitaminantagonistbehandling minskade ETP och topphöjd signifikant vid alla INR-värden (p<0,001), och INR är negativt korrelerat med TEP och topphöjden (R2=0,47, p<0,001). Fördröjningstiden ökade hos patienter jämfört med kontroller (3,3 mot 16,3 min, P<0,001). VKA minska protrombinomvandling genom att minska både den totala mängden protrombin omvandlas och den maximala hastigheten för protrombinas (Figur 1a-C). Överraskande dämpades graden av trombininaktivering hos patienter behandlade med VKA, och denna effekt var oberoende av INR (0,67 mot 0,58 min-1, p<0,001, figur 1D).
som tidigare rapporterats är trombinförfallskapaciteten huvudsakligen beroende av antitrombin-och fibrinogennivån i plasma. Antitrombinnivåerna i Plasma var jämförbara mellan friska försökspersoner och patienter på VKA (figur 2a) och visade en tydlig positiv korrelation med trombinförfallskonstanten i patientgruppen (R2=0,72, p<0,001, figur 2C). Eftersom antitrombinnivåerna inte skilde sig mellan friska försökspersoner och patienter, kunde skillnaden i TDC inte tillskrivas antitrombin. Däremot var fibrinogennivåerna förhöjda hos alla patienter, oavsett INR (Figur 2B), och var negativt korrelerade med TDC (R2=0,13, p<0,001, figur 2D). Därför utförde vi i silico-testning för att undersöka om trombinförfall dämpas hos patienter med förhöjda nivåer av fibrinogen, genom att beräkna protrombinomvandling som om fibrinogennivåerna var fysiologiska (den genomsnittliga fibrinogennivån som finns i gruppen friska försökspersoner). Figur 2e-F visar att trombinförfallskapaciteten hos patienter faktiskt reduceras jämfört med kontroller på grund av ökade fibrinogennivåer. Om i en in silico-modell av trombinförfallskapaciteten ersätts de uppmätta fibrinogennivåerna med de genomsnittliga friska fibrinogennivåerna, återställs trombinförfallskonstanten till normal (0, 67 mot 0, 63 min-1, p=0, 238) hos de VKA-behandlade patienterna.
slutsats: Trombindynamikanalys visar att protrombinomvandlingen reduceras hos patienter som behandlas med VKA och att trombininaktivering dämpas signifikant. Vi visar att den senare effekten kan hänföras till de förhöjda fibrinogennivåerna som följer med VKA-behandling.
Trombindynamik hos friska försökspersoner och VKA-patienter. (A) Protrombinomvandlingskurvor. (B) PCtot: total mängd protrombin konverterad; (C) PCmax: maximal hastighet för protrombinomvandling; (D) TDC: trombinförfallskapacitet. * p< 0, 05, **p<0, 01, ***p<0, 001 jämfört med friska försökspersoner.
Trombindynamik hos friska försökspersoner och VKA-patienter. (A) Protrombinomvandlingskurvor. (B) PCtot: total mängd protrombin konverterad; (C) PCmax: maximal hastighet för protrombinomvandling; (D) TDC: trombin sönderfallskapacitet. * p< 0, 05, **p<0, 01, ***p<0, 001 jämfört med friska försökspersoner.
plasmaantitrombin-och fibrinogenhalternas roll i dämpningen av trombininaktiveringskapaciteten hos patienter på VKA. (A) Antitrombinnivåer hos friska försökspersoner och patienter; (B) Fibrinogennivåer hos friska försökspersoner och patienter. (C-D) korrelationen mellan trombinförfallskapaciteten med antitrombin (C) och fibrinogennivåer (D). (E) den uppmätta trombinförfallskapaciteten hos friska försökspersoner och patienter. (F) den simulerade trombinförfallskapaciteten hos heathy-patienter och patienter vid fysiologiska fibrinogennivåer. * p< 0, 05, **p<0, 01, ***p<0, 001 jämfört med friska försökspersoner.
plasmaantitrombin-och fibrinogenhalternas roll i dämpningen av trombininaktiveringskapaciteten hos patienter på VKA. (A) Antitrombinnivåer hos friska försökspersoner och patienter; (B) Fibrinogennivåer hos friska försökspersoner och patienter. (C-D) korrelationen mellan trombinförfallskapaciteten med antitrombin (C) och fibrinogennivåer (D). (E) den uppmätta trombinförfallskapaciteten hos friska försökspersoner och patienter. (F) den simulerade trombinförfallskapaciteten hos heathy-patienter och patienter vid fysiologiska fibrinogennivåer. * p< 0, 05, **p<0, 01, ***p<0, 001 jämfört med friska försökspersoner.
Hemker: Diagnostica Stago: Rådgivning.