Les principales études de laboratoire utilisées dans le diagnostic de la sphérocytose héréditaire (HS) sont les suivantes:
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Numération globulaire complète
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Numération des réticulocytes
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Concentration moyenne d’hémoglobine corpusculaire (CMHC)
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Frottis de sang périphérique
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Taux de lactate déshydrogénase (LDH)
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Bilirubine fractionnée
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Cytométrie en flux utilisant le test de liaison à l’éosine-5′-maléimide (EMA)
ektacytométrie à gradient osmotique, bien que reconnue comme la technique de référence pour le diagnostic de la membrane des globules rouges (RBC) a rarement été utilisé en pratique clinique en raison de sa disponibilité limitée. Cependant, une nouvelle génération d’ektacytomètres a été développée qui pourrait entraîner une utilisation plus large de cette technique. Cette technique ne fait pas la différence entre l’HS et l’anémie hémolytique auto-immune (AIHA), mais elle distingue l’HS des autres troubles membranaires héréditaires.
Les caractéristiques classiques de laboratoire de HS sont les suivantes :
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Anémie légère à modérée
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Réticulocytose
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Augmentation de la CSMF
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Sphérocytes sur le frottis de sang périphérique
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Hyperbilirubinémie
La morphologie du RBC dans le SH est distinctive mais non diagnostique. L’anisocytose est importante et les plus petites cellules sont des sphérocytes. Contrairement aux sphérocytes associés à la maladie hémolytique immunitaire et aux lésions thermiques, les sphérocytes HS sont assez uniformes en taille et en densité. Les sphérocytes sont caractérisés par les éléments suivants:
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Absence de pâleur centrale
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Diminution du diamètre corpusculaire moyen
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Densité accrue.
Les RBC sphérocytaires ne sont pas spécifiques à HS. L’anémie hémolytique auto-immune peut également produire une sphérocytose, mais ce trouble peut généralement être exclu par des résultats négatifs sur un test d’antiglobuline directe.
Une augmentation du MCHC est une caractéristique des cellules RBC dans HS. Les valeurs de MCHC supérieures à la limite supérieure de la normale (35-36%) sont courantes. Cette augmentation de la CMCH est le résultat d’une légère déshydratation cellulaire. Le volume cellulaire moyen (VCM) chez les patients atteints de HS est en fait faible, probablement en raison de la perte membranaire et de la déshydratation cellulaire.
Le test le plus sensible pour l’HS est le test de fragilité osmotique incubé (OFT), qui est effectué après l’incubation des RBC pendant 18 à 24 heures dans des conditions stériles à 37 ° C. SOUVENT avec des RBC qui n’ont pas été incubés, l’hémolyse des cellules HS peut être démontrée chez certains patients, mais n’est pas fiable. Cela est particulièrement vrai pour les nouveau-nés, car les globules rouges fœtaux sont généralement plus résistants à l’hémolyse osmotique. Les résultats souvent incubés sont généralement anormaux. La stabilité de l’échantillon est essentielle pour le FFT et les échantillons de sang ne doivent pas être réfrigérés plus de 2 jours avant le test.
Bien que souvent utilisé pour le diagnostic de la SH, son exécution demande beaucoup de travail et de temps. Au lieu de cela, les lignes directrices actuelles recommandent l’utilisation de la cytométrie en flux pour dépister la SH.
D’autres tests de laboratoire utilisés pour diagnostiquer la HS comprennent le test d’autohémolyse et le test de lyse au glycérol. Ceux-ci sont rarement utilisés et n’offrent aucun avantage par rapport à SOUVENT.
Une caractérisation plus poussée de la lésion membranaire spécifique en recherchant des anomalies de la spectrine, de l’ankyrine, de la pallidine ou de la bande 3 est possible. L’électrophorèse sur gel de dodécylsulfate de sodium-polyacrylamide (SDS-PAGE) peut détecter la protéine défectueuse dans la plupart des cas; cela peut être utile pour distinguer l’HS d’autres troubles hématologiques qui peuvent l’imiter, tels que l’anémie dysérythropoïétique congénitale de type II. Cependant, ces études ne sont pas systématiquement effectuées et ne sont disponibles que dans certains laboratoires de recherche.
L’ektacytométrie à gradient osmotique est la technique de référence pour le diagnostic des troubles membranaires RBC. Dans cette technique, un viscosimètre à diffraction laser (ektacytomètre) mesure la déformabilité des érythrocytes en fonction continue de l’osmolalité du milieu dans lequel ils sont suspendus. L’ektacytométrie à gradient osmotique distingue la SH des autres pathologies membranaires héréditaires, mais ne la différencie pas de l’anémie hémolytique auto-immune.
D’autres tests sont indiqués chez les patients ayant connu une crise aplasique. Le dépistage du virus de l’herpès simplex, du parvovirus B19 et de la mononucléose infectieuse peut aider à identifier une étiologie infectieuse de la crise aplasique. Les niveaux de vitamine B12 et de folate doivent être mesurés pour déterminer les réserves nutritionnelles pendant la récupération après une crise aplasique.
Si le diagnostic est posé tard dans la vie, les patients doivent avoir une évaluation de leur état en fer, surtout s’ils ont reçu des transfusions sanguines fréquentes (par exemple, en raison d’épisodes hémolytiques multiples ou d’un diagnostic inexact) ou une supplémentation orale prolongée en fer pour l’anémie. Cette évaluation comprend la mesure des réserves de fer et des taux sériques de ferritine. Un dysfonctionnement hépatique ou des problèmes cardiaques peuvent être présents chez les patients présentant une surcharge en fer sévère.
La cholécystite et la lithiase biliaire sont des complications courantes de l’HS. Si le patient présente des signes et des symptômes d’hémolyse en plus de la douleur du quadrant abdominal supérieur droit, de la fièvre et de la leucocytose, une échographie de l’arbre biliaire doit être effectuée.
Si une crise aplasique est suggérée, une évaluation plus approfondie des globules blancs et des plaquettes doit être poursuivie. Cela peut nécessiter une aspiration de la moelle osseuse et une biopsie pour exclure l’aplasie ou la mégaloblastose. Il est rarement nécessaire d’aspirer la moelle osseuse pour les tests, sauf en cas de crise aplasique ou mégaloblastique. Les résultats des tests aident à évaluer la fonction de la moelle et le développement de la lignée.