Figuur 3: ICC met Drosha antilichaam (ab12286)
Humane vrouwelijke vruchtwaterpunctie die met Drosha (FITC) (1/25 verdunning) wordt behandeld. Het DNA is rood gelabeld met propidium jodide.
RISC en RITS
Studies in de kernsplijting gist (Schizosaccharomces pombe) hebben aangetoond dat centromeric zwijgen (het proces van het spreekverbod transgenes dat integreren in centromeric herhaal regio ‘ s) vereist onderdelen van de RNAi pad en daarom in dit geval een spreekverbod werkt op de transcriptionele niveau (Ekwall 2004; Verdel en Moazed 2005).
het effectorcomplex in splijtingsgist lijkt te verschillen van RISC. siRNAs wordt in plaats daarvan opgenomen in een complex genoemd RITS (RNA-veroorzaakte initiatie van Transcriptional Gen het tot zwijgen brengen). RITS bestaat uit een chromodomain eiwit (Chp1), Argonaute 1 (Ago1), een eiwit van onbekende functie, Tas3, evenals siRNA moleculen.
RITS richt zich op specifieke chromosomale gebieden voor het tot zwijgen brengen door de productie van een repressieve chromatinestructuur die heterochromatine wordt genoemd door histonmethylering.
samenvatting
RNAi gemedieerd door de introductie van lange dsRNA is gebruikt om de genfunctie in een verscheidenheid van organismen, waaronder planten en Drosophila, te onderzoeken, maar deze benadering kan niet worden toegepast op zoogdiercellen aangezien de introductie van dsRNA langer dan 30 nucleotiden een niet-specifieke interferonrespons (antivirale respons) induceert, die resulteert in de afbraak van mRNA en ook een globale remming van de mRNA-vertaling veroorzaakt.
om deze problemen te omzeilen, kunnen chemisch gesynthetiseerde siRNA-moleculen die Dicer-producten nabootsen, worden gebruikt om de genfunctie bij zoogdieren te onderzoeken.
als alternatief kunnen plasmide-vectoren die zijn ontworpen om korte HAARSPELDRNA-moleculen te produceren, worden benut om het tot zwijgen brengen van genen in zoogdiersystemen te induceren. Aldus, in de toekomst kan het haalbaar zijn om menselijke ziekten te behandelen door genuitdrukking af te sluiten door de degradatie van specifieke mRNA te leiden.
Zie alle RNA-interferentiebronnen.