Abstrakt
alfa-1-adrenerga receptorer av en icke-fusande muskelcellinje (BC3H1) har identifierats på intakta och trasiga cellpreparat med användning av högaffinitetsantagonisten prazosin. I intakta celler gav både jämvikts-och kinetiska studier KD-värden i intervallet 0,07-0,12 nM. Det maximala antalet bindningsställen bestämda genom Scatchard-analys handlade om 85,000 +/- 9,000 webbplatser / cell. Antagonister bundna till prazosinbindningsställena med Michaelis-Menten-egenskaper, och deras specificitet var typisk för alfa 1-adrenerga receptorer. Ingen signifikant modifiering av antagonistbindning observerades antingen efter cellstörning eller genom att sänka inkubationstemperaturen till 4 grader. I kontrast, i intakta celler vid 37 grader, agonist konkurrens kurvor var grunt med Hill koefficienter på mindre än 1. Heterogeniteten hos prazosinbindningsställen mot (–)- noradrenalin uppträdde också i prazosinmättnadsexperiment utförda i frånvaro och i närvaro av denna agonist. Efter cellstörning minskade EC50-värdena för agonistkonkurrenskurvor och Kullkoefficienterna var nära 1. När temperaturen sänktes från 37 grader till 4 grader ökade affiniteten för (–)-noradrenalin i intakta celler dramatiskt med 10 000 gånger och Tävlingskurvans Kullkoefficient var lika med enhet. Denna affinitetsförskjutning inducerad av temperaturen var inte så viktig i preparat med trasiga celler (50 gånger).