Los principales estudios de laboratorio utilizados en el diagnóstico de la esferocitosis hereditaria (HS) incluyen los siguientes:
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Recuento completo de células sanguíneas
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Recuento de reticulocitos
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Concentración media de hemoglobina corpuscular (MCHC)
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Frotis de sangre periférica
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Nivel de lactato deshidrogenasa (LDH)
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Bilirrubina fraccionada
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Citometría de flujo utilizando la prueba de unión a eosina-5 ‘ – maleimida (EMA)
Ektacitometría de gradiente osmótico, aunque reconocida como la técnica de referencia para el diagnóstico de la membrana de glóbulos rojos trastornos, rara vez se ha utilizado en la práctica clínica debido a su disponibilidad limitada. Sin embargo, se ha desarrollado una nueva generación de ektacitómetros que puede resultar en un uso más amplio de esta técnica. Esta técnica no diferencia entre la HS y la anemia hemolítica autoinmune (AIHA), pero distingue la HS de otros trastornos hereditarios de la membrana.
Las características clásicas de laboratorio de HS incluyen las siguientes :
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anemia de Leve a moderada
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Reticulocytosis
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Aumento de la CHCM
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Spherocytes en el frotis de sangre periférica
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la Hiperbilirrubinemia
RBC morfología en el SA es distintiva, sin embargo, no de diagnóstico. La anisocitosis es prominente, y las células más pequeñas son esferocitos. A diferencia de los esferocitos asociados con enfermedades hemolíticas inmunitarias y lesiones térmicas, los esferocitos HS son bastante uniformes en tamaño y densidad. Los esferocitos se caracterizan por lo siguiente:
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Falta de palidez central
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Disminución del diámetro corpuscular medio
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Aumento de la densidad.
Los glóbulos rojos esferocíticos no son específicos del HS. La anemia hemolítica autoinmune también puede producir esferocitosis, pero este trastorno generalmente se puede excluir por hallazgos negativos en una prueba de antiglobulina directa.
Un aumento de la HCM es un rasgo característico de las células de glóbulos rojos en HS. Los valores de HCM mayores que el límite superior de la normalidad (35-36%) son comunes. Este aumento de la HCM es el resultado de una deshidratación celular leve. El volumen celular medio (VCM) en pacientes con HS en realidad es bajo, presumiblemente debido a la pérdida de membrana y deshidratación celular.
La prueba más sensible para HS es la prueba de fragilidad osmótica incubada (OFT), que se realiza después de incubar glóbulos rojos durante 18-24 horas en condiciones estériles a 37°C. OFT con glóbulos rojos que no se han incubado puede demostrar hemólisis de células de HS en algunos pacientes, pero no es confiable. Esto es especialmente cierto en los recién nacidos, ya que los glóbulos rojos fetales generalmente son más resistentes a la hemólisis osmótica. Los resultados de la incubación a menudo suelen ser anormales. La estabilidad de la muestra es crítica para la OFT y las muestras de sangre no deben refrigerarse durante más de 2 días antes de la prueba.
Aunque la OFT se ha utilizado tradicionalmente para el diagnóstico de HS, su realización requiere mucho trabajo y mucho tiempo. En cambio, las directrices actuales recomiendan el uso de citometría de flujo para detectar HS.
Otras pruebas de laboratorio utilizadas para diagnosticar la HS incluyen la prueba de autohemólisis y la prueba de lisis de glicerol. Estos rara vez se utilizan y no ofrecen ninguna ventaja sobre la FRECUENCIA.
Es posible una caracterización adicional de la lesión de membrana específica mediante la búsqueda de anomalías en la espectrina, la anquirina, la pallidina o la banda 3. La electroforesis en gel de poliacrilamida y dodecil sulfato de sodio (SDS-PAGE) puede detectar la proteína defectuosa en la mayoría de los casos; esto puede ser útil para distinguir la HS de otros trastornos hematológicos que pueden imitarla, como la anemia diseritropoyética congénita tipo II. Sin embargo, estos estudios no se realizan de forma rutinaria y solo están disponibles en laboratorios de investigación seleccionados.
La ektacitometría de gradiente osmótico es la técnica de referencia para el diagnóstico de los trastornos de la membrana de los glóbulos rojos. En esta técnica, un viscosímetro de difracción láser (ektacitómetro) mide la deformabilidad de los eritrocitos como función continua de la osmolalidad del medio en el que están suspendidos. La ektacitometría de gradiente osmótico distingue la HS de otras patologías hereditarias de membrana, pero no diferencia la HS de la anemia hemolítica autoinmune.
Otras pruebas están indicadas en pacientes que han experimentado una crisis aplásica. Las pruebas para el virus del herpes simple, el parvovirus B19 y la mononucleosis infecciosa pueden ayudar a identificar una etiología infecciosa para la crisis aplásica. Se deben medir los niveles de vitamina B12 y folato para determinar las reservas nutricionales durante la recuperación de una crisis aplásica.
Si el diagnóstico se hace tarde en la vida, los pacientes deben tener una evaluación de su estado de hierro, especialmente si han recibido transfusiones de sangre frecuentes (por ejemplo, debido a múltiples episodios hemolíticos o un diagnóstico incorrecto) o suplementos de hierro oral prolongados para la anemia. Esta evaluación incluye la medición de las reservas de hierro y los niveles séricos de ferritina. En pacientes con sobrecarga férrica grave puede haber disfunción hepática o problemas cardíacos.
La colecistitis y la colelitiasis son complicaciones comunes de la HS. Si el paciente presenta signos y síntomas de hemólisis además de dolor en el cuadrante abdominal superior derecho, fiebre y leucocitosis, se debe realizar una ecografía del árbol biliar.
Si se sugiere una crisis aplásica, se debe realizar una evaluación adicional de los glóbulos blancos y las plaquetas. Esto puede requerir una aspiración de médula ósea y una biopsia para descartar aplasia o megaloblastosis. La obtención de aspirado de médula ósea para pruebas rara vez es necesaria, excepto en casos de crisis aplásica o megaloblástica. Los resultados de las pruebas ayudan a evaluar la función de la médula y el desarrollo del linaje.